| 西部马脑炎病毒基因组序列的半套式RT-PCR检测 |
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| 引用本文： | 赵月峨,于曼,邓永强,杨保安,吕富双,祝庆余,秦鄂德.西部马脑炎病毒基因组序列的半套式RT-PCR检测[J].微生物学免疫学进展,2003,31(1):7-10. |
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| 作者姓名： | 赵月峨 于曼 邓永强 杨保安 吕富双 祝庆余 秦鄂德 |
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| 作者单位： | 北京微生物流行病研究所,北京,100071 |
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| 摘 要： | 为进一步提高RT－PCR检测西部马脑炎病毒（WEE）病毒基因组方法的敏感性，采用半套式PCR扩增病毒基因组特异序列，首先采用逆转录法将病毒基因组RNA逆转录为cDNA，然后以此cDNA为模板，进行扩增。对扩增后电泳检查无可见DNA条带的产物进行半套式PCR；与此同时对扩增的循环数、Mg^ 浓度和退火温度等条件进行了优化，以进一步提高扩增的特异性。结果第一轮PCR未扩出特异笥片段的WEE病毒稀释度，其半套式扩增出特定大小的DNA产物；同时优化的条件提高了扩增产物的特异性。扩增产物约为190bp的单一DNA片段，其大小与预期的相一致，结果表明采用半套式RT－PCR方法检测WEE病毒的基因组序列的敏感性可提高100倍以上。
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| 关 键 词： | 西部马脑炎病毒 半套式RT－PCR 基因组序列 |
| 文章编号： | 1005-5673(2003)-01-0007-04 |
Detection of the genomic sequence of western equine encephalitis virus by seminested RT-PCR |
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| ZHAO Yue-e,YU Man,DENG Yong-qiang,et al..Detection of the genomic sequence of western equine encephalitis virus by seminested RT-PCR[J].Progress In Microbiology and Immunology,2003,31(1):7-10. |
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| Authors: | ZHAO Yue-e YU Man DENG Yong-qiang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Western equine encephalitis virus (WEE) Seminested RT-PCR Genomic sequence |
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