SYBR Green实时定量PCR分析灌注培养工艺中抗体基因稳定性 |
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引用本文: | 陈继军,安晨,秦海艳,乔玉玲,南建军,宋兰兰,熊颖,姜英,王建锋,房世娣,毛晓燕.SYBR Green实时定量PCR分析灌注培养工艺中抗体基因稳定性[J].微生物学免疫学进展,2018(1). |
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作者姓名: | 陈继军 安晨 秦海艳 乔玉玲 南建军 宋兰兰 熊颖 姜英 王建锋 房世娣 毛晓燕 |
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作者单位: | 兰州生物制品研究所有限责任公司第四研究室甘肃省疫苗工程技术研究中心; |
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摘 要: | 目的采用SYBR Green实时定量PCR分析灌注培养工艺过程中工程细胞株抗体基因的稳定性。方法取灌注培养0、7、14、21、28、35 d的CHO细胞,用SYBR Green实时定量PCR分析其抗体基因稳定性。使用标准曲线相对定量法分析CHO细胞中β-肌动蛋白和抗体基因拷贝数,以抗体基因拷贝数与β-肌动蛋白基因拷贝数的比值表示工程细胞中抗体基因水平。结果工程细胞株工作种子、发酵罐中不同时间点样品抗体基因拷贝数保持稳定,抗体基因拷贝数相对β-肌动蛋白基因为0.93±0.10,抗体基因相对含量与培养时间之间不相关(P=0.938)。结论抗体工程细胞株在灌注培养过程中抗体基因保持稳定。
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关 键 词: | SYBR Green 实时定量PCR 灌注培养 基因稳定性 工程细胞株 |
Development of SYBR Green real time quantitative PCR in analysis of stability for recombinant antibody gene in perfusion cultured cells |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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