| 腐皮镰刀菌SYBR Green实时荧光定量PCR快速检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 王瑜,马建忠,张伟杰,高恺,冯海霞,张莹,车团结.腐皮镰刀菌SYBR Green实时荧光定量PCR快速检测方法的建立[J].微生物学免疫学进展,2018(2). |
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| 作者姓名： | 王瑜 马建忠 张伟杰 高恺 冯海霞 张莹 车团结 |
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| 作者单位： | 兰州理工大学生命科学与工程学院生物系;甘肃省功能基因组与分子诊断重点实验室 |
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| 摘 要： | 目的建立一种能够快速、灵敏、特异的鉴定腐皮镰刀菌的SYBR Green实时荧光定量PCR。方法运用SYBR Green实时荧光定量PCR反应体系检测腐皮镰刀菌,并对此方法的特异性、灵敏度和稳定性进行评价。结果通过对45例样品的检测,结果显示SYBR Green实时荧光定量PCR特异性好,其检出率高于普通PCR;灵敏度高,对重组质粒标准品的检测灵敏度为1.0×10~2copies/μL;稳定性好,对质粒为1.0×10~7copies/μL、1.0×10~5copies/μL、1.0×10~3copies/μL的标准品重复检测10次,结果显示扩增反应Ct值的变异系数为0.96%~1.68%。结论SYBR Green实时荧光定量PCR检测腐皮镰刀菌,不仅特异性好,灵敏度高,稳定性好,而且简便、快速、易操作。
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| 关 键 词： | 腐皮镰刀菌 实时荧光定量聚合酶链式反应 SYBR Green |
Rapid identification of Fusarium solani by SYBR Green real time quantitative PCR |
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