| 抗H5N1亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体的制备及鉴定 |
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| 引用本文： | 曹振,秦亚曼,王传彬,王宏伟,陈西钊,苏敬良,田克恭.抗H5N1亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体的制备及鉴定[J].中国实验动物学报,2004,12(4):197-199. |
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| 作者姓名： | 曹振 秦亚曼 王传彬 王宏伟 陈西钊 苏敬良 田克恭 |
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| 作者单位： | 1. 农业部兽医诊断中心,北京,100094
2. 中国农业大学,北京,100094 |
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| 基金项目： | 科技部高致病性禽流感防治攻关项目(02-02)，国家科技公关计划项目(2004BA519A24)。 |
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| 摘 要： | 目的建立稳定分泌抗H5N1亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞系,为进一步研究禽流感诊断技术奠定基础。方法以纯化的H5亚型禽流感病毒按常规方法免疫BALBc小鼠,最后一次免疫后第3天取其脾细胞与SP20细胞在聚乙二醇作用下融合,用选择性培养、有限稀释法克隆和血凝抑制试验进行筛选,对获得阳性克隆株用ELISA方法进行亚型鉴定,并用37株H5、H7、H9亚型AIV测定其特异性、覆盖性。结果最后获得了3株分泌特异性抗体的杂交瘤细胞,命名为1E5、4A4、4B1,经长期体外培养和冻存后复苏能稳定地分泌抗体。经鉴定,其亚型均为IgG1、kappa链。腹水HI效价1∶210～1∶216,细胞培养上清HI效价1∶26～1∶28。3株杂交瘤所分泌的单克隆抗体均能与本中心保存的全部20株H5亚型禽流感病毒分离株发生反应,而与15株H9亚型禽流感病毒分离株、2株H7亚型禽流感病毒分离株以及H1H4、H6H15亚型禽流感病毒标准毒株均不反应,与鸡新城疫病毒、鹅新城疫病毒、鹅腺病毒和鸡产蛋下降综合征病毒等均无交叉反应。结论所获3株单克隆抗体可用于禽流感病毒特异性诊断试剂的研制。
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| 关 键 词： | 禽流感病毒 抗体 单克隆 血凝及抑制试验 |
| 文章编号： | 1005-4847(2004)04-0197-03 |
| 修稿时间： | 2004年10月9日 |
Preparation and Characterization of Monoclonal Antibody Specific to Hemagglutinin of Subtype H5 Avian Influenza Virus |
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| CAO Zhen ,QIN Ya_man ,WANG Chuan_bin ,WANG Hong_wei ,CHEN Xi_zhao ,SU Jing_liang ,TIAN Ke_gong.Preparation and Characterization of Monoclonal Antibody Specific to Hemagglutinin of Subtype H5 Avian Influenza Virus[J].Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica,2004,12(4):197-199. |
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| Authors: | CAO Zhen QIN Ya_man WANG Chuan_bin WANG Hong_wei CHEN Xi_zhao SU Jing_liang TIAN Ke_gong |
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| Institution: | CAO Zhen 1,QIN Ya_man 1,WANG Chuan_bin 1,WANG Hong_wei 1,CHEN Xi_zhao 1,SU Jing_liang 2,TIAN Ke_gong 1 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Avian Influenza Virus Antibodies monoclonal Hemagglutination Inhibition Tests |
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