| 小鼠Klf4基因的克隆及原核表达分析 |
| |
| 引用本文： | 王春生,罗芳,杜文敬,安铁洙.小鼠Klf4基因的克隆及原核表达分析[J].中国实验动物学报,2009,17(2):103-107. |
| |
| 作者姓名： | 王春生 罗芳 杜文敬 安铁洙 |
| |
| 作者单位： | 东北林业大学生命科学学院,哈尔滨,150040 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，东北林业大学引进人才科研启动基金 |
| |
| 摘 要： | 目的克隆Klf4基因并对其重组蛋白进行原核表达及分析。方法提取胎鼠皮肤mRNA后反转录为cDNA序列,用一对两端引入特定酶切位点引物,从该cDNA中扩增出Klf4基因编码区序列,将其克隆到pEasy-T3载体上。对质粒双酶切并回收其中Klf4基因片段后,克隆入pET-52b（＋）载体后转化Origmai B（DE3）型大肠杆菌,用IPTG诱导表达,最后采用SDS-PAGE对重组蛋白进行鉴定及分析。结果对所克隆的Klf4mRNA蛋白编码区的DNA序列分析表明,klf4CDS区包括终止密码子在内为1452 bp,与参照序列对比仅有四处存在差异,不仅其同源性达到99.72%,且其氨基酸序列同源性为100%;在IPTG诱导下pET-52b（＋）-Klf4重组质粒可表达与预期相符的约为57×103的蛋白质;经IPTG刺激后重组蛋白表达明显上调,其中IPTG为0.4 mol/L时效果最佳。结论从胎鼠皮肤中克隆的Klf4基因可在原核中表达。
|
| 关 键 词： | Klf4 克隆 原核表达 |
Cloning and Prokaryotic Expression of Krüppel-Like Factor 4 in Mouse |
| |
| WANG Chun-sheng,LUO Fang,DU Wen-jing,AN Tei-zhu.Cloning and Prokaryotic Expression of Krüppel-Like Factor 4 in Mouse[J].Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica,2009,17(2):103-107. |
| |
| Authors: | WANG Chun-sheng LUO Fang DU Wen-jing AN Tei-zhu |
| |
| Institution: | (College of Life Sciences,Northeast Forestry University,Harbin 150040,China) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Klf4 |
| 本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
