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利用CRISPR-Cas9敲除Tyr基因制作白化C57BL/6N小鼠
引用本文:常秋荣,刘丽丽,王会阳,付丽,邢凤英,李垚,陈学进,李善刚.利用CRISPR-Cas9敲除Tyr基因制作白化C57BL/6N小鼠[J].中国实验动物学报,2019(4):493-500.
作者姓名:常秋荣  刘丽丽  王会阳  付丽  邢凤英  李垚  陈学进  李善刚
作者单位:上海交通大学医学院实验动物科学部;昆明理工大学灵长类转化医学研究院
基金项目:国家重点研发计划(2016YFC1304805);上海市科研计划项目(15140901700)~~
摘    要:目的 为了获得白化的C57BL/6N小鼠,扩大其在皮肤移植和胚胎干细胞方面研究中的应用。方法 通过体外设计合成Cas9 mRNA和系列sgRNA(single guide RNAs),注射到小鼠的受精卵内,破坏合成C57BL/6N小鼠黑色素生成必须的酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)基因序列的第1和第2外显子,产生基因突变,获得F0代白化的C57BL/6N小鼠,然后经过重复回交和自交,形成白化C57BL/6N小鼠近交系。结果 经过注射两对sgRNA,成功的获得了F0代的白化小鼠,在Tyr基因的第1和第2外显子中均发生了缺失突变,小鼠可以将突变基因传递给后代,并在其后代中产生了纯合的白色C57BL/6N小鼠,最后对白化小鼠突变类型进行了分析。结论 通过CRISPR-Cas9技术破坏了小鼠Tyr基因,成功地建立了白化C57BL/6N小鼠近交系,为将来的嵌合体制作、组织移植提供了新的研究工具。

关 键 词:白化  Tyr  基因敲除  CRISPR-Cas9  C57BL/6N  小鼠

Knockout of Tyr gene by CRISPR-Cas9 to produce albino C57BL/6N mice
CHANG Qiurong,LIU Lili,WANG Huiyang,FU Li,XING Fengying,LI Yao,CHEN Xuejin,LI Shangang.Knockout of Tyr gene by CRISPR-Cas9 to produce albino C57BL/6N mice[J].Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica,2019(4):493-500.
Authors:CHANG Qiurong  LIU Lili  WANG Huiyang  FU Li  XING Fengying  LI Yao  CHEN Xuejin  LI Shangang
Institution:(Department of Laboratory Animal Science,School of Medicine,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200025,China;Institute of Primate Translational Medicine,Kunming University of Science and Technology,Kunming 650500)
Abstract:CHANG Qiurong;LIU Lili;WANG Huiyang;FU Li;XING Fengying;LI Yao;CHEN Xuejin;LI Shangang(Department of Laboratory Animal Science,School of Medicine,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200025,China;Institute of Primate Translational Medicine,Kunming University of Science and Technology,Kunming 650500)
Keywords:Albino  Tyr  gene knockout  CRISPR-Cas9  C57BL/6N  mouse
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