| 东方田鼠特异DNA片段的克隆及核苷酸序列分析 |
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| 引用本文： | 杨榕,胡维新,朱敏,彭兴华.东方田鼠特异DNA片段的克隆及核苷酸序列分析[J].中国实验动物学报,2001,9(2):67-72. |
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| 作者姓名： | 杨榕 胡维新 朱敏 彭兴华 |
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| 作者单位： | 中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心,长沙 410078 |
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| 基金项目： | 国家科技部"九五”国家科技攻关项目(96-A23-06-04);湖南省科技厅"九五”科技攻关配套基金;国家自然科学基金(30070403) |
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| 摘 要： | 目的获得东方田鼠的特异DNA序列.方法Aβ基因使用PCR,基因克隆,斑点杂交,DNA序列分析,生物信息学技术.结果根据小鼠MHCⅡ外显子2及其两侧序列,合成引物并扩增东方田鼠基因组DNA,将PCR产物回收、测序后,分别设计内引物扩增东方田鼠基因组DNA,其中一对引物可得到特异性扩增带,将得到的DNA片段插入PGEM-Teasy载体,进行序列分析.用这对引物扩增人、昆明小鼠、BALB/c小鼠及C57BL/6J小鼠基因组DNA,均无扩增产物.以东方田鼠特异性扩增产物为探针进行斑点杂交,除东方田鼠基因组DNA外,其他几种动物基因组DNA均为阴性结果.进一步对该DNA片段进行了BLAST同源性搜索和外显子预测,在Genbank中没有发现高度同源序列,并且找到一个可能的外显子,该外显子由69个氨基酸组成.结论获得的DNA片段为东方田鼠的特异片段,这将为从分子水平深入研究东方田鼠的遗传背景、生物进化规律以及东方田鼠抗日本血吸虫的机理奠定基础.
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| 关 键 词： | 东方田鼠 DNA 序列分析 |
| 文章编号： | 1005-4847(2001)02-0067-06 |
| 修稿时间： | 2000年9月21日 |
The Cloning of Specific DNA Fragment in Microtus Fortis and Its Nucleotide Sequencing |
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| YANG Rong,HU Weixin,ZHU Min,PENG Xinghua.The Cloning of Specific DNA Fragment in Microtus Fortis and Its Nucleotide Sequencing[J].Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica,2001,9(2):67-72. |
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| Authors: | YANG Rong HU Weixin ZHU Min PENG Xinghua |
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| Institution: | YANG Rong,HU Weixin1,ZHU Min,PENG Xinghua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Microtus Fortis DNA Sequencing |
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