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猪瘟病毒E2基因在昆虫细胞/杆状病毒中的表达
引用本文:张文杰,李向东,赵铁柱,邓小雨,胡冬梅,孙明,遇秀玲,陈西钊,田克恭.猪瘟病毒E2基因在昆虫细胞/杆状病毒中的表达[J].中国实验动物学报,2007,15(1):30-34.
作者姓名:张文杰  李向东  赵铁柱  邓小雨  胡冬梅  孙明  遇秀玲  陈西钊  田克恭
作者单位:1. 中国农业大学动物医学院,北京,100094
2. 农业部兽医诊断中心,北京,100094
摘    要:目的利用昆虫细胞/杆状病毒系统表达猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白,用于E2蛋白功能、开发CSF新型疫苗以及建立相关血清学诊断方法等研究。方法采用RT-PCR扩增CSFV E2基因,将PCR产物克隆到pGEM-T-Easy载体,将该基因插入到pFast-BacHT A载体中,构建重组转座载体后转化DH10Bac感受态细胞,获得重组Bacmid质粒后转染sf9昆虫细胞,传毒3代,对表达蛋白进行Western-blot及免疫组化鉴定。结果成功克隆CSFVE2基因,其核苷酸序列为1119 bp。SDS-PAGE电泳结果显示表达E2蛋白相对分子质量约为43×103,Western-blot和免疫组化结果证实表达蛋白能够被CSFV标准阳性血清识别。结论在Bac-to-Bac杆状病毒系统中的成功表达了CSFV E2蛋白,与CSFV标准阳性血清具有较好的反应性。

关 键 词:猪瘟病毒  E2基因  杆状病毒  表达
文章编号:1005-4847(2007)01-0030-05
修稿时间:2006年6月4日

Expression of E2 Gene of Classical Swine Fever Virus in Insect Cell/Baculovrius Expression System
ZHANG Wen-jie,U Xiang-dong,ZHAO Tie-zhu,DENG Xiao-yu,HU Dong-mei,SUN Ming,YU Xiu-ling,CHEN Xi-zhao,TIAN Ke-gong.Expression of E2 Gene of Classical Swine Fever Virus in Insect Cell/Baculovrius Expression System[J].Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica,2007,15(1):30-34.
Authors:ZHANG Wen-jie  U Xiang-dong  ZHAO Tie-zhu  DENG Xiao-yu  HU Dong-mei  SUN Ming  YU Xiu-ling  CHEN Xi-zhao  TIAN Ke-gong
Abstract:
Keywords:Classical swine fever virus  E2 protein  Baculovirus  Expression
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