| 大鼠冠状病毒和仙台病毒的双重PCR检测方法的建立与应用 |
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| 引用本文： | 孟钰榕,郑龙,祝岩波,王璇,尤红煜,刘健敏,栗彦宁,连伟光,张东明,王俊霞.大鼠冠状病毒和仙台病毒的双重PCR检测方法的建立与应用[J].中国实验动物学报,2019(2):181-186. |
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| 作者姓名： | 孟钰榕 郑龙 祝岩波 王璇 尤红煜 刘健敏 栗彦宁 连伟光 张东明 王俊霞 |
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| 作者单位： | 河北省实验动物重点实验室河北医科大学实验动物学部;河北医科大学第二医院 |
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| 基金项目： | 国家科技支持计划(2015BAI07B02)~~ |
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| 摘 要： | 目的建立快速检测实验大鼠冠状病毒和仙台病毒的双重PCR方法。方法根据大鼠冠状病毒N基因、仙台病毒L基因设计特异性引物;经过双重PCR优化,特异性和敏感性的检测,建立双重PCR体系。应用该PCR体系检测人工感染仙台病毒组织DNA样本和实验动物组织样本,并与ELISA方法比对。结果双重PCR扩增出大鼠冠状病毒(168 bp)和仙台病毒(262 bp)目的条带,PCR扩增产物测序结果利用核酸BLAST功能进行同源序列对比,仙台病毒和大鼠冠状病毒同源性分别为100%和99%。仙台病毒和大鼠冠状病毒的检测下限为1.56×10~2 copies/μL。特异性检测对小鼠肝炎病毒扩增,产生片段大小近似大鼠冠状病毒产物。应用建立的双重PCR体系检测人工感染仙台病毒组织DNA样本,30份DNA标本均被检出;检测94份实验动物肺组织样本,结果均阴性。结论建立的双重PCR方法操作简单、快速、特异性强、灵敏度高,能够实现对实验动物仙台病毒和大鼠冠状病毒病原体的快速检测。
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| 关 键 词： | 大鼠冠状病毒 仙台病毒 双重PCR |
Establishment and application of a duplex PCR assay for detection of Rat coronavirus and Sendai virus |
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| MENG Yurong,ZHENG Long,ZHU Yanbo,WANG Xuan,YOU Hongyu,LIU Jianmin,LI Yanning,LIAN Weiguang,ZHANG Dongming,WANG Junxia.Establishment and application of a duplex PCR assay for detection of Rat coronavirus and Sendai virus[J].Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica,2019(2):181-186. |
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| Authors: | MENG Yurong ZHENG Long ZHU Yanbo WANG Xuan YOU Hongyu LIU Jianmin LI Yanning LIAN Weiguang ZHANG Dongming WANG Junxia |
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| Institution: | (Hebei Provincial Key Laboratory of Laboratory Animals, Department of Laboratory Animal Science, Hebei Medical University, Shijiazhuang 050000, China;the Second Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050000) |
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| Abstract: | MENG Yurong;ZHENG Long;ZHU Yanbo;WANG Xuan;YOU Hongyu;LIU Jianmin;LI Yanning;LIAN Weiguang;ZHANG Dongming;WANG Junxia(Hebei Provincial Key Laboratory of Laboratory Animals, Department of Laboratory Animal Science, Hebei Medical University, Shijiazhuang 050000, China;the Second Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050000) |
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| Keywords: | Rat coronavirus Sendai virus duplex PCR |
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