| SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR测定猴免疫缺陷病毒RNA拷贝数方法的建立 |
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| 引用本文： | 丛喆,李兆忠,魏强,许琰,蒋虹,佟巍,卢圣栋,涂新明.SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR测定猴免疫缺陷病毒RNA拷贝数方法的建立[J].中国实验动物学报,2006,14(4):271-275. |
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| 作者姓名： | 丛喆 李兆忠 魏强 许琰 蒋虹 佟巍 卢圣栋 涂新明 |
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| 作者单位： | 1. 中国医学科学院,中国协和医科大学实验动物研究所,北京,100021
2. 中国医学科学院,中国协和医科大学基础医学研究所,北京,100730 |
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| 摘 要： | 目的 建立SYBR Green Ⅰ荧光染料实时定量RT-PCR方法,测定猴免疫缺陷病毒(SIV)RNA拷贝数.方法 巢式RT-PCR扩增SIV病毒RNA gag基因上1360-1837之间的长度为477 bp的片段,将该片段克隆到pGEM T载体上,构建pGEM-SIVgag477质粒.该质粒经限制性内切酶Not I酶切后,进行体外转录,转录出的RNA产物(RS)纯化后10倍系列稀释,作出标准曲线,作为SIV病毒RNA荧光定量检测的外标准品.结果 应用Qiagen公司QuantiTect SYBR GREEN RT-PCR Kit,该标准品可精确定量到100 copies/μL.结论 制备的RS外标准品纯度高,SYBR Green Ⅰ荧光染料实时定量RT-PCR法特异性、敏感性高,稳定性好,可用于定量测定猴免疫缺陷病毒(SIV)RNA拷贝数.
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| 关 键 词： | 病毒载量 实时荧光定量RT-PCR SYBR Green Ⅰ |
| 文章编号： | 1005-4847(2006)04-0271-05 |
| 修稿时间： | 2005年11月1日 |
Quantification of Simian Immunodeficiency Virus (SIV) Viral Load Using Real-Time Quantitative RT-PCR with SYBR Green Ⅰ |
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| GONG Zhe,LI Zhao-zhong,WEI Qiang,XU Yan,JIANG Hong,TONG Wei,LU Sheng-dong,TU Xin-ming.Quantification of Simian Immunodeficiency Virus (SIV) Viral Load Using Real-Time Quantitative RT-PCR with SYBR Green Ⅰ[J].Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica,2006,14(4):271-275. |
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| Authors: | GONG Zhe LI Zhao-zhong WEI Qiang XU Yan JIANG Hong TONG Wei LU Sheng-dong TU Xin-ming |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SIV |
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