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小鼠原核胚玻璃化冷冻保存技术的研究
引用本文:朱士恩,权国波,吴通义,周崇,曾申明,张忠诚.小鼠原核胚玻璃化冷冻保存技术的研究[J].中国实验动物学报,2003,11(2):69-73.
作者姓名:朱士恩  权国波  吴通义  周崇  曾申明  张忠诚
作者单位:中国农业大学动物科技学院,北京,100094
基金项目:北京市自然科学基金项目 (60 12 0 11),国家“863”项目 (2 0 0 1AA2 13 0 91)部分内容
摘    要:目的 原核胚是转基因等生物技术所必需的主要材料 ,其冷冻保存使操作不受时间和空间的限制。另外 ,冷冻保存还可以避免体外培养过程中的细胞发育阻断期。方法 在室温 (2 0℃或 2 5℃ )条件下 ,以乙二醇、DMSO为主体抗冻保护剂配制成的玻璃化溶液 (EFS、EDT、EDFS) ,不借助冷冻仪 ,对小鼠原核胚进行一步法和二步法玻璃化冷冻保存。结果  2 0℃室温条件下 ,用EDFS4 0平衡 1min一步法冷冻解冻后的原核胚 ,经培养后囊胚发育率最高仅为 4 7% ,与新鲜原核体外培养的对照组 (75 % )的差异极显著 (P <0 0 1) ;当原核在 10 %E +10 %D溶液中预处理 5min ,移入EDFS30中平衡 30s二步法冷冻保存 ,解冻后的囊胚发育率达 6 8%。而室温升至 2 5℃ ,二步法冷冻保存后原核胚的囊胚发育率高达 77% ,与对照组差异无显著性 (P >0 0 5 )。用最佳冷冻组的原核胚或解冻后培养到囊胚移植给受体母鼠均获得产仔。结论 本研究对小鼠原核胚实施玻璃化冷冻保存 ,经体外培养和移植结果与对照组无显著性差异 ,证明了本方法的可行性

关 键 词:受精卵  玻璃化冷冻  小鼠
文章编号:1005-4847(2003)02-0069-05
修稿时间:2002年7月10日

Studies on Cryopreservation of Mouse Zygotes by Vitrification
ZHU Shi en,QUAN Guo bo,WU Tong yi,ZHOU Chong,ZENG Shen ming,ZHANG Zhong cheng.Studies on Cryopreservation of Mouse Zygotes by Vitrification[J].Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica,2003,11(2):69-73.
Authors:ZHU Shi en  QUAN Guo bo  WU Tong yi  ZHOU Chong  ZENG Shen ming  ZHANG Zhong cheng
Abstract:
Keywords:Fertilized Ovum  Vitrification  Mice
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