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重组逆转录病毒介导的转蚓激酶基因兔
引用本文:刘殿峰,张嘉保,张守峰,任文陟,姚伟,张锐,扈荣良.重组逆转录病毒介导的转蚓激酶基因兔[J].中国实验动物学报,2007,15(6):449-452.
作者姓名:刘殿峰  张嘉保  张守峰  任文陟  姚伟  张锐  扈荣良
作者单位:1. 吉林大学实验动物中心,吉林,长春,130062
2. 军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130062
3. 长春市标准化信息编码研究所,吉林,长春,130011
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)
摘    要:目的通过重组逆转录病毒介导获得转蚓激酶基因家兔。方法将含有蚓激酶基因的表达盒插入到逆转录病毒载体pLNCL中获得了蚓激酶重组逆转录病毒载体,利用脂质体转染PA317包装细胞,G418进行筛选得到了阳性细胞克隆,克隆扩大培养后病毒上清直接注射雄性兔的睾丸组织转染精原干细胞。结果病毒上清经NIH3T3细胞进行滴度测定,最高滴度为1×104CFU/mL。病毒注射3月龄兔睾丸组织,过1.5个月取其睾丸、肾、脾、肝、肺进行组织切片观察,结果正常。提取交配所得F0、F1代仔兔基因组,经PCR、Southern检测,转基因阳性率F0代为6.3%(2/32)、F1代为15.3%(2/13)。结论通过重组逆转录病毒直接注射3月龄兔睾丸组织可获得转基因兔,病毒对兔的脏器无损害。

关 键 词:蚓激酶  重组逆转录病毒  包装  转染  转基因
文章编号:1005-4847(2007)06-0449-04
修稿时间:2007年5月10日

Lumbrukinase Transgene Rabbit Mediated by Recombinant Retrovirus
LIU Dian-feng,ZHANG Jia-bao,ZHANG Shou-feng,REN Wen-zhi,YAO Wei,ZHANG Rui,HU Rong-liang.Lumbrukinase Transgene Rabbit Mediated by Recombinant Retrovirus[J].Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica,2007,15(6):449-452.
Authors:LIU Dian-feng  ZHANG Jia-bao  ZHANG Shou-feng  REN Wen-zhi  YAO Wei  ZHANG Rui  HU Rong-liang
Abstract:
Keywords:Lumbrukinase  recombinant retrovirus  Packaging  Transfection  transgene  Rabbit
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