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SIVp27单克隆抗体的制备和鉴定
引用本文:孙敏,涂新明,魏强,丛喆,蒋虹,佟巍,陈颂,赖春晖,于浩,秦川.SIVp27单克隆抗体的制备和鉴定[J].中国实验动物学报,2005(Z1).
作者姓名:孙敏  涂新明  魏强  丛喆  蒋虹  佟巍  陈颂  赖春晖  于浩  秦川
作者单位:中国医学科学院实验动物研究所中国协和医科大学实验动物学部 北京100021 (孙敏,涂新明,魏强,丛喆,蒋虹,佟巍,陈颂,赖春晖,于浩),中国医学科学院实验动物研究所中国协和医科大学实验动物学部 北京100021(秦川)
摘    要:目的]建立SIVp27杂交瘤细胞株,并对其分泌的SIVp27单克隆抗体进行初步鉴定。方法]使用基因重组的SIVp27蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术使用半固体培养基法建立杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体。通过染色体核型对杂交瘤细胞株进行鉴定;采用Westernblot、免疫荧光法、酶联免疫吸附法确定单克隆抗体的交叉反应性、相对亲和力、抗原识别表位、免疫球蛋白的类型和亚类,对单克隆抗体进行鉴定。结果]获得四株可稳定分泌SIVp27单克隆抗体的杂交瘤细胞,1C3、2B6为IgG1类,2E12为IgG2b类,3G3为IgG2a类。四株单抗均能识别SIV的p27蛋白,与逆转录病毒SRV、STLV无交叉反应,2B6、2E12与HIVp24有交叉反应。免疫荧光法检测腹水效价为1:10240~40960。1C3、2B6、2E12、3G3染色体平均数分别为103、97、96、101。2E12与3G3识别不同的抗原表位。结论]成功地制备出四株SIVp27单克隆抗体,均具有良好的特异性和亲和力,为进一步建立免疫分析方法,进行SIV/SAIDS及其艾滋病相关研究,奠定了基础。

关 键 词:猴免疫缺陷病毒(SIV)  p27蛋白  杂交瘤  单克隆抗体

Preparation and characterization of the monoclonal antibody against SIV p27 antigen
Sun Min,Tu Xinming,Wei Qiang,Cong Zhe,Jiang Hong,Tong Wei,Yu Hao,Qin ChuanInstitute of Laboratory Animal Sciences,Chinese Academy of Medical Sciences andPeking Union Medical College,Beijing ,China.Preparation and characterization of the monoclonal antibody against SIV p27 antigen[J].Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica,2005(Z1).
Authors:Sun Min  Tu Xinming  Wei Qiang  Cong Zhe  Jiang Hong  Tong Wei  Yu Hao  Qin ChuanInstitute of Laboratory Animal Sciences  Chinese Academy of Medical Sciences andPeking Union Medical College  Beijing  China
Institution:Sun Min,Tu Xinming*,Wei Qiang,Cong Zhe,Jiang Hong,Tong Wei,Yu Hao,Qin Chuan*Institute of Laboratory Animal Sciences,Chinese Academy of Medical Sciences andPeking Union Medical College,Beijing 100021,China
Abstract:
Keywords:SIV  p27 protein  hybridoma  monoclonal antibody
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