小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α下游新靶基因PTG的克隆 |
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引用本文: | 赵剑,韩云,朱应葆.小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α下游新靶基因PTG的克隆[J].中国生物化学与分子生物学报,2005,21(6):737-742. |
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作者姓名: | 赵剑 韩云 朱应葆 |
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作者单位: | 北京大学第三医院中心实验室分子生物室,北京,100083 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(No.30070232)~~ |
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摘 要: | 为了进一步研究过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)下游靶基因,应用基因芯片技术比较经过氧化物酶体增殖物(peroxisomeproliferators,PPs)处理和未处理鼠肝RNA,获得经PPs处理而上调的一个EST(expressedsequencetag),C3f.用5′RACE法获得其全长cDNA,并命名为PTG.Northern法检测PTG的组织分布.结果显示,在小鼠心脏、肝脏、肾脏、睾丸等组织,PTG有高表达.Northern印迹检测AOX敲除的小鼠发现,PTG转录水平明显升高,而在Wy14643处理的AOXPPARα双敲除的小鼠没有发现升高.实时监测PPs处理小鼠肝脏PTG表达水平的变化,发现处理2h后,PTG表达水平提高了2倍,这说明PTG是PPARα的早期反应基因.利用PTGEGFP表达质粒转染NIH3T3细胞,显示PTG蛋白定位于质膜下.进一步用Rab5aEGFP和PTGDsRed双定位载体共转染,结果表明,PTG蛋白定位于早期内吞体.
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关 键 词: | PPARα PTG 基因克隆 基因定位 |
收稿时间: | 2005-12-20 |
修稿时间: | 2005年6月28日 |
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