| 胸苷激酶基因在人二倍体成纤维细胞衰老过程中的表达调控 |
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| 引用本文： | 张凌凌,张婷婷,毛泽斌.胸苷激酶基因在人二倍体成纤维细胞衰老过程中的表达调控[J].中国生物化学与分子生物学报,2005,21(2):184-189. |
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| 作者姓名： | 张凌凌 张婷婷 毛泽斌 |
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| 作者单位： | 北京大学医学部生物化学与分子生物学系,北京,100083 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (No .3 0 1710 2 7)~~ |
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| 摘 要： | 为研究人胸苷激酶 (humanthymidinekinase ,hTK)基因在复制衰老细胞及早衰细胞中表达下调的分子机制 ,构建了含hTK启动子的荧光素酶报告基因载体 .转染结果显示 ,复制衰老细胞与早衰细胞中hTK启动子的转录活性比年轻细胞中下降了近 3倍 ,表明转录水平的调控是hTK在衰老细胞中表达下降的主要调控机制 .定点突变的结果显示 ,转录因子Sp1、NF Y结合位点的突变可使hTK启动子活性降低近 5 0 % ,而E2F结合位点的突变可使其活性升高 2倍多 ,提示Sp1和NF Y是hTK基因的转录活化因子 ,而E2F为转录抑制因子 .电泳迁移率变更实验发现 ,与年轻细胞相比 ,Sp1、NF Y与hTK启动子的DNA结合活性在复制衰老细胞和早衰细胞中无明显改变 ,提示转录活化因子Sp1、NF Y并非hTK在衰老细胞中下调的主要因素 .染色质免疫共沉淀结果显示 ,在细胞内Rb结合在hTK启动子上 ,且同年轻细胞相比 ,复制衰老细胞及早衰细胞中的hTK启动子结合着更多的Rb ,这提示细胞衰老过程中Rb的去磷酸化可能与hTK基因在衰老过程中的下调有关 .
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| 关 键 词： | 细胞衰老 人胸苷激酶基因 表达调控 Rb |
| 收稿时间： | 2005-04-20 |
| 修稿时间： | 2004年5月10日 |
Regulation Mechanism of TK Gene Expression in Cellular Senescence of Human Diploid Fibroblasts |
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| ZHANG Ling-Ling,ZHANG Ting-Ting,MAO Ze-Bin.Regulation Mechanism of TK Gene Expression in Cellular Senescence of Human Diploid Fibroblasts[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2005,21(2):184-189. |
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| Authors: | ZHANG Ling-Ling ZHANG Ting-Ting MAO Ze-Bin |
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| Institution: | (Department of Biochemistry and Molecular Biology, Peking University Health Science Center, Beijing 100083, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cellular senescence human thymidine kinase gene expression regulation Rb |
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