人皮肤成纤维细胞中α1(Ⅰ)前胶原基因转录调控研究 |
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引用本文: | 高春芳,王皓,徐玲玲,赵文静,孔宪涛.人皮肤成纤维细胞中α1(Ⅰ)前胶原基因转录调控研究[J].中国生物化学与分子生物学报,2002,18(3):293-298. |
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作者姓名: | 高春芳 王皓 徐玲玲 赵文静 孔宪涛 |
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作者单位: | 第二军医大学附属长征医院全军医学免疫中心,上海,200003 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目 (No .39870 30 1),长征医院“2 0 8”计划资助项目 |
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摘 要: | 为寻找纤维化形成中调控人Ⅰ型前胶原基因高水平转录的启动序列及其DNA结合蛋白 ,以人皮肤成纤维细胞α1(Ⅰ )前胶原基因转录起始点上游 - 2 5kb至 + 4 2bp的片段为靶序列 ,采用PCR、基因重组、报告基因测活、细胞基因转染技术比较不同长短启动子活性 .凝胶滞留实验 (EM SA)研究高启动活性片段相应的DNA结合蛋白 .基因转染高活性转录因子识别序列至靶细胞 ,探讨前胶原基因激活阻断的新手段 .结果表明 ,- 2 4 83~ + 4 2bp、 - 2 6 8~ + 4 2bp序列具有强启动调控活性 ,而 - 10 5~ + 4 2bp片段启动活性最低 .EMSA对高启动活性小片段DNA结合蛋白的分析提示 ,- 2 6 8~ + 4 2bp序列中存在转录因子Ap 1、Sp 1、NF 1的特异结合位点 .转染高活性转录因子识别序列Ap 1、Sp 1至靶细胞可竞争性阻断胶原基因启动转录激活 .研究提示 ,人α1(Ⅰ )前胶原基因 - 2 4 83~ + 4 2bp、 - 2 6 8~ + 4 2bp片段有高启动活性 .转录因子Ap 1、Sp 1、NF 1与 - 2 6 8~ + 4 2bp序列中相应识别序列的结合与其基础高转录活性有关 .转染高活性转录因子识别序列Ap 1、Sp 1可从转录水平阻断胶原基因的激活
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关 键 词: | 前胶原 启动子 转录因子 基因 纤维化 |
收稿时间: | 2002-06-20 |
修稿时间: | 2001年8月10日 |
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