TNFα诱导激活NF-κB上调抑癌基因CDKN2B表达

NF-κB通过转录调控其靶基因，在肿瘤发生发展和精准治疗中起关键作用。过表达抑癌基因细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B（CDKN2B）可抑制肿瘤细胞增殖并诱导凋亡，但是否受NF-κB调节尚无报道。本文发现，NF-κB直接结合并上调CDKN2B基因：在TNFα处理的HeLa细胞内，CDKN2B的基因区覆盖大量NF-κB结合峰，其中富集倍数大于20的结合峰有14个。TRANSFAC软件分析发现，NF-κB结合峰内包含大量经典的κB位点。ChIP-qPCR证明，TNFα诱导NF-κB结合CDKN2B基因。将NF-κB结合峰中心区DNA片段插入荧光素酶报告基因载体中，发现该DNA片段的插入使荧光素酶相对活性上调至7.88倍，TNFα处理又使其相对活性提高到2.37倍，且NF-κB/p65 siRNA显著干扰其相对活性的升高。免疫荧光检测显示，TNFα诱导激活NF-κB进入细胞核，而NF-κB/p65 siRNA阻止它入核。此结果提示，我们成功构建了具有NF-κB转录活性差异的细胞模型，qPCR检测两个已知的NF-κB靶基因NFKB2和STAT5A的表达，进一步验证该细胞模型构建成功。利用此细胞模型，发现受TNFα诱导激活的NF-κB，能够上调CDKN2B基因。总之，本文发现抑癌基因CDKN2B是NF-κB新的靶基因，NF-κB直接结合并上调CDKN2B基因在转录水平的表达。本研究为抑癌基因CDKN2B的抗肿瘤应用奠定了基础。