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短发夹结构RNA干扰新城疫病毒的增殖
引用本文:岳华,汤承,李定霏,傅安静,马丽.短发夹结构RNA干扰新城疫病毒的增殖[J].中国生物化学与分子生物学报,2007,23(2):154-159.
作者姓名:岳华  汤承  李定霏  傅安静  马丽
作者单位:西南民族大学生命科学与技术学院,成都,610041
基金项目:国家科技攻关计划;四川省应用基础研究计划
摘    要: 以新城疫病毒(NDV)NP基因为标靶,构建3个细胞内表达发夹样结构小干扰RNA(shRNA)的质粒载体,在鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸡胚上进行了RNAi试验,筛选出一个有效抑制病毒复制的小分子ndv1.用阳离子脂质体转染试剂Silent-fect 将ndv1转染CEF,以不相关shRNA质粒载体HK为阴性对照,4 h后接种NDV,与对照相比,干涉组在病毒感染后3 h NP基因的表达量降低2.3倍,6 h 降低21.1倍,9 h降低9.8倍;ndv1能在48 h内完全阻断NDV在CEF中的增殖,延缓病变出现时间,减轻病变程度.将Silent-fect-ndv1混合物与NDV同时注入10日龄SPF鸡胚绒毛尿囊腔,能使105 ELD50NDV感染后17 h鸡胚尿囊液中病毒增殖量减少94.4%,使106 ELD50NDV感染后17 h鸡胚尿囊液中病毒增殖量减少62.5%.实验结果证实,在CEF中存在RNAi机制,抑制NDV NP基因的表达能有效阻断该病毒增殖,说明NP基因在NDV复制过程中起重要作用.实验结果为进一步利用RNAi技术在CEF和鸡胚中研究病毒基因组功能及筛选抗病毒小分子奠定了基础.

关 键 词:RNA干涉  小发夹结构RNA  新城疫病毒  鸡胚成纤维细胞  鸡胚
收稿时间:2006-08-31
修稿时间:2006年8月31日

Interference of New Castle Disease Virus Replication by Short Hairpin RNAs
YUE Hua,TANG Cheng,LI Ding-Fei,FU An-Jing,MA Li.Interference of New Castle Disease Virus Replication by Short Hairpin RNAs[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2007,23(2):154-159.
Authors:YUE Hua  TANG Cheng  LI Ding-Fei  FU An-Jing  MA Li
Institution:(College of Life Science and Technology, Southwest University for Nationalities, Chengdu 610041, China)
Abstract:
Keywords:RNAi  short hairpin RNAs  new castle disease virus  chicken embryo fibroblasts  embryonated chicken eggs
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