| 抗人小细胞肺癌单克隆抗体的重链变区基因的体外扩增、克隆和序列分析 |
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| 引用本文： | 刘健,吴文书,王斌,潘志美,田培坤,黄震宇,洪锦心.抗人小细胞肺癌单克隆抗体的重链变区基因的体外扩增、克隆和序列分析[J].中国生物化学与分子生物学报,1993,9(1):70-75. |
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| 作者姓名： | 刘健 吴文书 王斌 潘志美 田培坤 黄震宇 洪锦心 |
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| 作者单位： | 上海市肿瘤研究所免疫室，上海市肿瘤研究所免疫室，上海市肿瘤研究所免疫室，上海市肿瘤研究所免疫室，上海市肿瘤研究所免疫室，上海市肿瘤研究所免疫室，上海市肿瘤研究所免疫室 上海 200032，上海 200032，上海 200032，上海 200032，上海 200032，上海 200032，上海 200032 |
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| 摘 要： | 本文从抗人小细胞肺癌单克隆抗体杂交瘤细胞中抽提总RNA,合成第一链cDNA,直接用PCR技术(polymerase chain reaction)扩增出351bp的重链变区基因(V_H),克隆至pUCV_(NP)-PCR载体上,经筛选得一批插入片段为351bp的阳性克隆,经核苷酸序列分析研究,证实已获得了该单克隆抗体的重链可变区基因。
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| 关 键 词： | 聚合酶链反应 重链可变区基区 嵌合抗体 杂交瘤细胞 通用引物 |
| 收稿时间： | 1993-02-20 |
Cloning and Sequencing of Immunoglobulin Heavy Variableregion Gene by Polymerase Chain Reaction |
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| Liu,Jian Wu,Wen-shu Wang,Bin Pan,Zhi-mei Tian,Pei-kun Huang,Zhen-yu Hong,Jin-xin.Cloning and Sequencing of Immunoglobulin Heavy Variableregion Gene by Polymerase Chain Reaction[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,1993,9(1):70-75. |
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| Authors: | Liu Jian Wu Wen-shu Wang Bin Pan Zhi-mei Tian Pei-kun Huang Zhen-yu Hong Jin-xin |
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| Institution: | (Dept. of Immunol. and Cell Biol. Shanghai Cancer Institute, Shanghai 200032 |
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| Abstract: | We have designed a set of oligonucleotide primers to amplify the cDNA of mouse immunoglobulin heavy variable-region gene by polymerase chain reaction. The primers incorporate restriction sites that allow the cDNA of the variable domain to be force-cloned for sequencing and expression. Here we have applied the technique to clone and sequence the heavy variable domain of monoclonal antibody that reacts with human small cell lung carcinoma line NCI H128. The result shows that the length of heavy variable-region gene of this antibody is 351 base pairs. |
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| Keywords: | Polymerase chain reaction Immunoglobulin heavy variable-region gene Chimeric antibody Hybridoma Universal primers |
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