过表达PTPα促进K562细胞体外增殖能力和体内致瘤性

探讨蛋白质酪氨酸磷酸酶α（PTPα）在血液肿瘤细胞中的特异性表达，研究过量表达PTPα对人红白血病细胞K562生物学行为的影响及在裸鼠体内致瘤能力的改变.首先应用RT-PCR和Western 印迹检测3种不同类型造血系肿瘤细胞（K562、NB4、Jurkat T）中PTPα的表达水平.根据检测结果,选择K562细胞作为研究对象，利用脂质体将 PTPα 真核表达载体转染K562细胞，通过G418筛选获得阳性克隆，RT-PCR和Western 印迹验证过表达情况；经MTT法检测细胞增值能力的改变；用流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞分化状态；并将阳性克隆细胞皮下接种裸鼠，观察 PTPα 基因转染前后细胞系在裸鼠体内的致瘤能力及瘤体的组织化学变化.上述实验结果表明，通过G418压力筛选获得了 PTPα 高表达多克隆细胞系K562-PTPα；经体外增殖实验分析,实验组K562-PTPα细胞与未转染组细胞K562和转染空载体组细胞K562-splice相比，细胞生长速度增快，G₂/M期细胞比例增加( P <0.05)，而细胞分化状态无明显变化；裸鼠体内致瘤实验显示,K562组、K562-splice组和K562 PTPα组平均瘤重分别为(1.1±0.3)g、(1.3±0.2)g和(2.5±0.5)g；病理切片显示,K562-PTPα组瘤体组织分化程度较对照组低、恶性程度高，细胞的致瘤能力增强( P <0.01).综上所述，过表达PTPα使K562细胞具有更强的体外增殖能力和体内致瘤性，表明PTPα可能在造血系统恶性肿瘤的发生发展中发挥促进作用.