鸡二价金属转运蛋白1 cDNA的克隆与序列分析

鸡二价金属转运蛋白1（divalent metal transporter 1, DMT1）在动物胃肠道锰吸收过程中起重要作用.根据哺乳动物Dmt1同源蛋白氨基酸序列的保守性设计引物，应用3′RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术，扩增并克隆获得鸡小肠Dmt1 cDNA 3′端1 289bp和1 092bp的2种片段，发现其3′端翻译区和非翻译区存在差异. 根据鸡Dmt1 cDNA 3′端片段的测序结果设计引物，扩增获得1个与3′端片段部分重叠的鸡Dmt1 cDNA 5′端907 bp片段，并对其进行了克隆测序. 根据鸡小肠Dmt1 3′RACE片段和5′RACE片段序列信息进行拼接，从而获得鸡小肠Dmt1 cDNA全序列信息.结果表明，鸡小肠Dmt1 cDNA有2种形式，1种全长为1 972个核苷酸，其中5′非翻译区为104个核苷酸，编码区1 695个核苷酸，3′非翻译区为173个核苷酸，编码1个含564个氨基酸残基的蛋白质；另1种形式为1 775个核苷酸，其中5′非翻译区为104个核苷酸，编码区1 593个核苷酸，3′非翻译区为78个核苷酸，编码1个含530个氨基酸残基的蛋白质.据鸡Dmt1 cDNA推测出的2种形式蛋白质的氨基酸序列与人、大鼠和小鼠的Dmt1蛋白具有高度同源性，它们的同源性分别为82%、82%、80%,和 84%、84%、83%. 对推测氨基酸序列进行疏水性和跨膜区分析表明，Dmt1蛋白为1种跨膜整合蛋白，具有膜转运蛋白糖基化位点和底物结合位点的保守序列.

Cloning and Sequence Analysis of Divalent Metal Transporter 1 cDNA of Chickens