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| 快速构建蛋白质结构域克隆库的方法 | |
| 引用本文： | 马素参,黄海明,彭隽敏,俞强,任瑞宝,高友鹤.快速构建蛋白质结构域克隆库的方法[J].中国生物化学与分子生物学报,2003,19(4):537-541. |
| 作者姓名： | 马素参 黄海明 彭隽敏 俞强 任瑞宝 高友鹤 |
| 作者单位： | 1. 中国医学科学院,中国协和医科大学,基础医学研究所病理生理学系,医学分子生物学国家重点实验室,中国医学科学院蛋白质组学研究中心,北京,100005 2. 美国Emory大学,亚特兰大,30322 3. 美国Boston大学,波士顿,02215 4. 美国Brandeis大学,波士顿,02454 |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划 (863 ) (No .2 0 0 1AA2 3 3 0 5 1)，国际科技合作重点项目计划 (No .2 0 0 2AA2 2 90 3 1)，重大基础研究前期研究专项项目计划(No .2 0 0 2CCA0 410 0 )资助~~ |
| 摘 要： | 对蛋白质组学的研究有许多不同的切入方法 .从研究的生物学意义和可行性考虑 ,提出从蛋白结构域入手进行蛋白质组学研究 .SH2 (Srchomology 2 )结构域是细胞信号转导中重要的元件之一 ,人SH2结构域共有约 12 0种 ,对其进行研究将深刻揭示细胞信号转导的规律 .为了得到人所有的SH2结构域序列及克隆 ,首先在公共数据库里检索出了人所有的SH2结构域序列 ,利用国际上现有的共享资源IMAGE(IntegratedMolecularAnalysisofGenomesandTheirExpression)克隆为PCR模板 ,解决了从cDNA文库中难以克隆低丰度结构域的问题 .利用有方向性的TOPO克隆技术提高克隆效率 ,从而快速高效地构建了包括 6 0个SH2结构域的克隆库 .克隆库可以方便地转换到GATEWAY系统具有各种用途的载体上 ,为SH2结构域的蛋白质组学研究奠定了坚实的基础 |
| 关 键 词： | 结构域蛋白质组学 SH2结构域 结构域克隆库 |
| 收稿时间： | 2003-08-20 |
| 修稿时间： | 2002年12月27 |
Rapid Method of Constructing Domain Library |
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| MA Su can ,HUANG Hai ming ,PENG Jun min ,YU Qiang ,REN Rui bao ,GAO You he.Rapid Method of Constructing Domain Library[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2003,19(4):537-541. | |
| Authors: | MA Su can HUANG Hai ming PENG Jun min YU Qiang REN Rui bao GAO You he |
| Institution: | ( 1) Department of Pathophysiology,National Laboratory of Medical Molecular Biology, Proteomics Research Center, Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy of Medical Science & Peking Union Medical College, Beijing 100005,China; 2) Emory University,Atlanta 30322,USA; 3) Boston University,Boston 02215,USA; 4) Brandeis University,Boston 02454,USA |
| Abstract: | There are many approaches for proteomics research. It was proposed to study domains in proteomics because domains were biologically important and members of each domain were limited. SH2 (Src homology 2) domain was an important element in signal transduction and there were about 120 SH2 domains in human cells. Public databases were searched to obtain all human SH2 domain sequence information. Royalty-free IMAGE clones were used as template instead of cDNA library for high efficiency directional TOPO cloning into multipotential GATEWAY entry vector. All clones were verified by sequencing. A SH2 domain library with sixty clones was constructed rapidly for SH2 domain proteomics research. |
| Keywords: | domain proteomics SH2 domain domain library |
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