| 敲减人MCHR2基因抑制CHO细胞的放射性 配体受体结合能力及Ca 2+释放 |
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| 引用本文： | 袁成福,杨俊霞,刘革力,卜友泉,张琴,易发平,马永平,宋方洲.敲减人MCHR2基因抑制CHO细胞的放射性 配体受体结合能力及Ca 2+释放[J].中国生物化学与分子生物学报,2008,24(1):60-68. |
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| 作者姓名： | 袁成福 杨俊霞 刘革力 卜友泉 张琴 易发平 马永平 宋方洲 |
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| 作者单位： | 1. 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室,教育部临床检验诊断学重点实验室,重庆,400016;湖北民族学院医学院,恩施,445000
2. 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室,教育部临床检验诊断学重点实验室,重庆,400016 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金
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重庆市自然科学基金 |
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| 摘 要： | 研究人黑色素浓集激素受体2(MCHR2)基因特异的小发夹RNA(shRNA)真核表达载体pGenesil-1-MCHR2-shRNA对MCHR2表达及特征的影响.将pGenesil-1-MCHR2-shRNA转染到稳定表达人MCHR2基因的CHO细胞中，通过RT-PCR和 Western印迹检测MCHR2表达的变化；放射性配体结合实验（RBA）检测受体最大结合容量B max及平衡解离常数Kd值的变化；钙流检测实验观察配体MCH刺激后单个细胞Ca 2+释放及MCH半数有效浓度EC50的变化.与转染pGenesil-1空载体组比较，pGenesil-1-MCHR2-shRNA 能使MCHR2基因mRNA表达减少45.8％～66.4％；蛋白表达减少44.2％～81.0％； B max减少39.4％～78.7％，Kd值升高40.9％～81.9％；EC 50升高114.8％～822.4％.MCHR2基因shRNA真核表达载体能有效抑制MCHR2基因的表达，减少Bmax、升高Kd值及EC 50，从而对MCHR2生物活性等特征产生影响.
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| 关 键 词： | MCHR2 shRNA真核表达载体 基因表达 生物特征 |
| 收稿时间： | 2007-06-20 |
| 修稿时间： | 2007年6月20日 |
Down-regulate Human MCHR2 Expression Inhibites the Receptor Binding to Its Radioligands and Reduces Calcium Release in CHO Cells |
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| YUAN Cheng-Fu,YANG Jun-Xia,LIU Ge-Li,BU You-Quan,ZHANG Qin,YI Fa-Ping,MA Yong-Ping,SONG Fang-Zhou.Down-regulate Human MCHR2 Expression Inhibites the Receptor Binding to Its Radioligands and Reduces Calcium Release in CHO Cells[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2008,24(1):60-68. |
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| Authors: | YUAN Cheng-Fu YANG Jun-Xia LIU Ge-Li BU You-Quan ZHANG Qin YI Fa-Ping MA Yong-Ping SONG Fang-Zhou |
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| Institution: | Department of Biochemistry and Molecular Biology，Chongqing Medical University，Chongqing 400016, China； Medical College of Hubei Institute for Nationalities, Enshi 445000,China
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| Abstract: | |
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| Keywords: | MCHR2 shRNA eukaryotic expressing vector gene expression biological characterization |
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