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新城疫病毒V_4株NP基因的克隆、序列测定及真核表达载体的构建
引用本文:于健,孙琦,王久莉,姜万富,陈奖励,宋秀龙,李树祥.新城疫病毒V_4株NP基因的克隆、序列测定及真核表达载体的构建[J].中国生物化学与分子生物学报,2000,16(5):620-625.
作者姓名:于健  孙琦  王久莉  姜万富  陈奖励  宋秀龙  李树祥
作者单位:哈尔滨医科大学附属第二医院耳鼻喉科,哈尔滨,150086
基金项目:黑龙江省自然科学基金(项目编号:96)及哈尔滨医科大学211工程资助项目
摘    要:研究新城疫病毒 ( NDV)核衣壳蛋白基因的生物学作用 ,以提纯的 NDV V4 株基因组 RNA为模板 ,化学合成 NP基因的特异核苷酸引物 ,RT- PCR扩增 NP基因 c DNA,得到一条 1 .5kb的DNA带 ,与 NDV NP基因大小一致 ,平端连接克隆到 p UC1 1 9质粒中 .阳性克隆经酶切鉴定及序列分析表明已获得新城疫病毒 V4 株 NP基因克隆 .将 NDV V4 株 NP基因碱基序列与已发表的NDV Beaudettec C株、La Sota株、D2 6株的 NP基因的碱基序列比较 ,同源性分别为 90 .64%、90 .1 7%、98.0 3% ,氨基酸序列差异率是 4.50 %、5.93%、2 .45% .NDV V4 株 NP基因与已发表的NDV Beaudettec C株、La Sota株、D2 6株的 NP基因有所不同 ,但具有高度同源性 .将 NDV V4 株NP基因 c DNA克隆到 pc DNA3 真核表达载体中 ,构建表达 NP蛋白真核质粒

关 键 词:新城疫病毒  核衣壳蛋白基因  反转录-聚合酶链反应  分子克隆  序列测定  
收稿时间:2000-10-20
修稿时间:1999-11-24

Cloning and Nucleotide Sequence Analysis of the Nucleocapsid Protein Gene of NDV Strain V_4 and Construction of Eukaryotic Vector
YU Jian,SUN Qi,WANG Jiu-li,JIANG Wan-fu,CHEN Jiang-li,SONG Xiu-long,LI Shu-xiang.Cloning and Nucleotide Sequence Analysis of the Nucleocapsid Protein Gene of NDV Strain V_4 and Construction of Eukaryotic Vector[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2000,16(5):620-625.
Authors:YU Jian  SUN Qi  WANG Jiu-li  JIANG Wan-fu  CHEN Jiang-li  SONG Xiu-long  LI Shu-xiang
Institution:YU Jian ,SUN Qi ,WANG Jiu-li ,JIANG Wan-fu ,CHEN Jiang-li ,SONG Xiu-long (Second Affiliated Hospital of Harbin Medical University,Harbin 150086,China)
Abstract:
Keywords:Newcastle disease virus  Nucleocapsid protein gene  RT-PCR  Cloning  Sequencing
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