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人血小板生成素全长分子在酵母系统中的分泌表达及活性分析
引用本文:田生礼,刘丽,芦兴武,孟岩,谢宝树,刘立忠,王颖,冷爱军.人血小板生成素全长分子在酵母系统中的分泌表达及活性分析[J].中国生物化学与分子生物学报,1998,14(4):358-364.
作者姓名:田生礼  刘丽  芦兴武  孟岩  谢宝树  刘立忠  王颖  冷爱军
作者单位:空军总医院空军临床分子生物学研究中心
基金项目:全军“九五”医药卫生科研基金
摘    要:外源基因可通过整合型载体被整合到毕赤酵母(Pichiapastoris)染色体上,获得遗传性稳定分泌表达株.利用酵母信号肽MFα,对该信号肽蛋白酶识别位点的相关序列进行重新设计,使天然人TPO成熟肽在毕赤酵母系统中分泌表达成功.表达产物经Western-blot进行分析,分子量约为66kD处蛋白条带可被TPO抗体识别;表达量约为0.1g/L;N端氨基酸序列分析结果与设计的一致;表达产物对小鼠骨髓细胞形成巨核细胞集落形成单位(megakary-ocytecolonyformingunit,CFU-Meg)具有明显的刺激作用.

关 键 词:血小板生成素  毕赤酵母  分泌表达  活性测定  
收稿时间:1998-08-20
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