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重组人蛋白激酶CK 2α亚基的原核表达、纯化与鉴定
引用本文:刘新光,梁念慈,马涧泉.重组人蛋白激酶CK 2α亚基的原核表达、纯化与鉴定[J].中国生物化学与分子生物学报,2000,16(1):17-22.
作者姓名:刘新光  梁念慈  马涧泉
作者单位:1. 广东医学院医用生化研究所,湛江,524023
2. 中山医科大学生化教研室,广州,510089
基金项目:广东省自然科学基金!(940 586),广东省高教厅重点学科经费资助项目
摘    要:将构建成功的人蛋白激酶 CK2 α亚基 c DNA的重组质粒 ,转化大肠杆菌 BL2 1 ( DE3) ,IPTG诱导后获特异高效表达 ,表达蛋白占菌体总蛋白的 30 % ,但大多数重组蛋白以不溶形式存在 .表达产物依次进行 DE- 5 2、P1 1磷酸纤维素和肝素 - Sepharose柱层析分离 ,最后从 30 9mg可溶性蛋白质中得到 6.1 mg纯化蛋白 . SDS- PAGE显示纯化的蛋白质为一分子量 4 2 k D的单一蛋白带 .Western- blot的结果证明 :纯化的表达产物与抗人 CK2α抗体可发生特异性免疫反应 . CK2α和β亚基等摩尔分子混合可组成有完全活性的全酶 .重组的 CK2全酶的性质和功能与该酶的已知特性一致 .这些结果证明重组蛋白是人蛋白激酶 CK2 α亚基

关 键 词:人蛋白激酶CK2α亚基  原核表达  蛋白质纯化  
收稿时间:2000-02-20
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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