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改良手工显微切割法获取特定细胞提取高质量RNA
引用本文:周广彪,胡盛平,刘静文,张可浩,官兵,吴名耀,沈忠英,杨捷生.改良手工显微切割法获取特定细胞提取高质量RNA[J].中国生物化学与分子生物学报,2006,22(3):252-252~257.
作者姓名:周广彪  胡盛平  刘静文  张可浩  官兵  吴名耀  沈忠英  杨捷生
作者单位:1. 汕头大学医学院,分子生物学中心,汕头,515031
2. 汕头大学医学院,病理学教研室,汕头,515031
3. 汕头大学医学院,肿瘤医院胸外科,汕头,515031
基金项目:广东省博士启动基金;教育部留学回国人员科研启动基金;汕头大学校科研和教改项目
摘    要:探讨显微切割过程中有效保持RNA完整性的组织固定方法,建立一种简易的手工显微切割法.应用自制“T形板”辅助冰冻切片,100%无水乙醇一次性脱水固定,“排除切割法”获取目的细胞,用TRIzol提取RNA,琼脂糖凝胶电泳和RT-PCR分析RNA质量.“一步法”固定可长时间保存RNA的完整性;从食管癌标本5个特定阶段的细胞中提取的RNA,经电泳和RT-PCR分析均具有较高的质量.无水乙醇“一步法”固定,在显微切割的过程中可有效保持RNA的完整性;T形板和“排除切割法”简化了手工显微切割的操作,提取的RNA质、量均可满足后续分子水平研究的需要.

关 键 词:食管癌  组织固定  显微切割  RNA提取  
收稿时间:2005-8-1
修稿时间:2005年8月1日

Modified Manual Microdissection in Procuring Defined Cellsfor High-Qulitity RNA Acquisition
ZHOU Guang-Biao,HU Sheng-Ping,LIU Jing-Wen,ZHANG Ke-Hao,GUAN Bing,WU Ming-Yao,SHEN Zhong-Ying,YANG Jie-Sheng.Modified Manual Microdissection in Procuring Defined Cellsfor High-Qulitity RNA Acquisition[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2006,22(3):252-252~257.
Authors:ZHOU Guang-Biao  HU Sheng-Ping  LIU Jing-Wen  ZHANG Ke-Hao  GUAN Bing  WU Ming-Yao  SHEN Zhong-Ying  YANG Jie-Sheng
Institution:(CenterforMolecularBiology,DepartmentofPathology,DepartmentofThoracicSurgery,TumorHospital;ShantouUniversityMedicalCollege,Shantou515031,China
Abstract:
Keywords:esophageal neoplasm  tissue fixation  microdissection  RNA extraction
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