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一种鉴定MNSs红细胞血型单克隆抗体类型的方法的建立
引用本文:陈琦,曹慧,张海燕,高晓飞,李厚达.一种鉴定MNSs红细胞血型单克隆抗体类型的方法的建立[J].中国生物化学与分子生物学报,2007,23(5):419-422.
作者姓名:陈琦  曹慧  张海燕  高晓飞  李厚达
作者单位:扬州大学医学院生理学教研室,扬州,225001
摘    要:为鉴定MNSs血型单克隆细胞株6D7C9分泌的抗体类型,通过克隆、亚克隆、细胞转染等分子生物学技术建立了血型糖蛋白GPA、GPB的异源表达系统,并将其作为抗原,通过ELISA、Western 印迹法确定6D7C9分泌的McAb.结果显示,RT-PCR技术成功克隆获得了GPA、GPB血型糖蛋白编码基因,通过分别构建其重组逆转录病毒表达载体pEGZ/GPA及pEGZ/GPB,转染包装细胞293T,再感染L929细胞,经zeocin筛选2周后,RT PCR及流式细胞仪分析证实,L929/GPA和L929/GPB转基因细胞中分别有GPA、GPB目的基因的转录和蛋白表达.用稳定高表达GPA、GPB的转基因细胞通过ELISA和Western 印迹法证实单克隆细胞株6D7C9分泌的是抗GPA/GPB McAb.本研究成功地建立了血型糖蛋白GPA、GPB的异源表达系统,为MNSs血型McAb的检测及GPA、GPB蛋白的功能学研究奠定了基础.

关 键 词:血型糖蛋白A  血型糖蛋白B  单克隆抗体  基因表达  
收稿时间:2006-9-5
修稿时间:2006年9月5日

Establishment of a Method Used in Identification of the MNSs Blood Group Monoclonal Antibody
CHEN Qi,CAO Hui,ZHANG Hai-Yan,GAO Xiao-Fei,LI Hou-Da.Establishment of a Method Used in Identification of the MNSs Blood Group Monoclonal Antibody[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2007,23(5):419-422.
Authors:CHEN Qi  CAO Hui  ZHANG Hai-Yan  GAO Xiao-Fei  LI Hou-Da
Institution:DepartmentofPhysiology,MedicalCollege,YangzhouUniversity,Yangzhou225001,Jiangsu,China
Abstract:
Keywords:glycophorin A  glycophorin B  monoclonal antibody  gene expression
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