| 人源CDC50基因的分子克隆及在E.coli中的表达 |
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| 引用本文： | 陈培拉,季永镛,常智杰,张淑平,孙兵,傅新元,刘力.人源CDC50基因的分子克隆及在E.coli中的表达[J].中国生物化学与分子生物学报,2004,20(2):183-188. |
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| 作者姓名： | 陈培拉 季永镛 常智杰 张淑平 孙兵 傅新元 刘力 |
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| 作者单位： | 陈培拉（清华大学基因组研究所,北京,100084）
季永镛（中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所,上海,200031）
常智杰（清华大学基因组研究所,北京,100084）
张淑平（清华大学基因组研究所,北京,100084）
孙兵（中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所,上海,200031）
傅新元（清华大学基因组研究所,北京,100084;美国耶鲁大学病理学系,纽黑文,CT,06520）
刘力（清华大学基因组研究所,北京,100084;中国医学科学院基础医学研究所,北京,100005） |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划项目(973项目)(No.001510006) |
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| 摘 要： | 糖皮质激素受体 (GR)为一种特异性配体诱导的转录因子在机体发育、生理及行为等过程中发挥重要作用 .这一过程往往受到转录协同调节因子的控制 ,包括协同抑制因子或协同激活因子的作用 .克隆了人源双跨膜受体分子 ,并命名为hCDC5 0 .该分子编码区有 10 5 6bp ,与鼠源基因mCDC5 0在核苷酸水平有 90 %一致性 .将hCDC5 0蛋白的 16 4～ 317编码序列与GST融合构建原核表达质粒进行重组蛋白的表达与纯化并制备多抗 .用二维双向扩散检测抗体为阳性 ,抗原的滴度为12 5 μg/ml.体外翻译研究显示该基因编码蛋白约为 4 0kD ,与Western检测在动物细胞中的表达一致 .用hCDC5 0真核表达质粒与GR萤光报告系统共转染COS 7细胞显示 ,hCDC5 0对GR信号转导有明显的抑制作用 ,其对GR信号通路的抑制作用达 3～ 4倍以上 .hCDC5 0可能为一个新的协同抑制因子 ,在抑制GR的转录激活过程中起作用
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| 关 键 词： | 糖皮质激素受体 协同抑制因子 人源CDC50 克隆与表达 |
| 收稿时间： | 2004-04-20 |
| 修稿时间： | 2003年3月28日 |
Molecular Cloning and Expression of Human CDC50 Gene in E.coli |
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| CHEN Pei\|la\,JI Yong\|yong\,CHANG Zhi\|jie\ ZHANG Shu\|ping\ SUN Bing\,FU Xin\|yuan\,LIU Li\\{,\.Molecular Cloning and Expression of Human CDC50 Gene in E.coli[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2004,20(2):183-188. |
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| Authors: | CHEN Pei\|la\ JI Yong\|yong\ CHANG Zhi\|jie\ ZHANG Shu\|ping\ SUN Bing\ FU Xin\|yuan\ LIU Li\\{ \ |
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| Institution: | ( 1) Tsinghua Institute of Genome Research, Tsinghua University,Beijing\ 100084,China; 2) Institute of Basic Medicine,Chinese Academy of Medical Sciences, Beijing\ 100005,China; 3) Shanghai Institute of Biochemistry and Cell Biology,Chinese Academy of Sciences,Shanghai\ 200031,China; 4) Department of Pathology,Yale University School of Medicine,New Haven,CT 06520,USA |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | glucocorticoid receptor co-repressor human CDC50 cloning and expression |
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