乏氧诱导因子-1α基因沉默对肺癌细胞乏氧应答相关基因表达的影响

乏氧诱导因子-1α (HIF-1α)是肿瘤细胞适应乏氧微环境的关键调控因子，具有作为治疗靶基因的潜力，以克服乏氧诱导的治疗抗拒等效应.下调其表达可能影响肿瘤细胞内一系列乏氧应答相关基因的表达.本研究采用已构建的HIF-1α RNAi慢病毒载体转导肺腺癌A549细胞，经杀稻瘟素（blasticidin）筛选建立HIF-1α基因稳定沉默的A549细胞株.应用cDNA微阵列技术检测并比较HIF-1α基因沉默A549细胞株和其亲本细胞株在常氧和乏氧状态下的基因表达谱改变. 应用定量RT PCR方法验证部分cDNA芯片差异表达基因的表达改变.HIF-1α基因稳定沉默细胞株A549/HIF-1α，在常氧和乏氧条件下HIF-1αmRNA水平分别较A549细胞下降89.2％和88.1％，HIF-1α蛋白水平分别下降97.2％和88.4％. 在乏氧条件下，cDNA微阵列检测的1 280个基因中,52个基因表达上调，15个基因表达下调. HIF-1α基因沉默显著影响其中27个基因的乏氧诱导效应.定量RT-PCR验证其中ENO2、BCL-2、CXCR4和MMP11的表达水平，与cDNA芯片结果相符合.结果提示，HIF-1α基因沉默能够在一定程度上阻断肺癌细胞的乏氧应答，在克服乏氧导致的肺癌治疗抗拒方面具有潜力.