食管癌细胞NGAL5′侧翼区存在TPA应答元件 |
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引用本文: | 许丽艳,李恩民,王子良,牛永东,蔡唯佳,袁华敏,常静霞,沈忠英,曾毅.食管癌细胞NGAL5′侧翼区存在TPA应答元件[J].中国生物化学与分子生物学报,2006(2). |
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作者姓名: | 许丽艳 李恩民 王子良 牛永东 蔡唯佳 袁华敏 常静霞 沈忠英 曾毅 |
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作者单位: | 北京工业大学生命科学与生物工程学院病毒与药理研究室,汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室,汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室,汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室,汕头大学医学院肿瘤病理研究室,汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室,汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室,汕头大学医学院肿瘤病理研究室,北京工业大学生命科学与生物工程学院病毒与药理研究室 北京100022,汕头大学医学院肿瘤病理研究室,汕头515041,汕头515041,汕头515041,汕头515041,汕头515041,汕头515041,汕头515041,汕头515041,北京100022 |
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基金项目: | 国家自然科学基金面上项目(No.39900069,No.30170428,No.30370641,No.30570849),广东省自然科学基金重点项目(No.37788,No.05104541),广东省自然科学基金面上项目(No.010431)~~ |
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摘 要: | 在TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中,NGAL(neutrophil gelatinase-associated lipocalin)过表达,提示食管癌细胞NGAL转录调控区可能存在TPA应答元件.为了对食管癌细胞NGAL的这一TPA应答元件进行分段定位鉴定,首先将NGAL5′侧翼区不同长度片段-1 431~ 84-、1 137~ 84、-945~ 84、-657~ 84、-416~ 84和-152~ 84等依次插入质粒pGLP,构建NGAL/pGLP系列报告基因荧光素酶表达载体pGLP-1431、pGLP-1137、pGLP-945、pGLP-657、pGLP-416和pGLP-152;然后将上述质粒分别同pRL-TK共转染食管癌细胞EC109,最后用5 ng/ml的TPA刺激转染的EC109,检测报告基因荧光素酶活力,综合判定报告基因荧光素酶活力变化趋势,并以此对食管癌细胞NGAL5′侧翼区TPA应答元件进行分段定位.实验结果表明,食管癌细胞NGAL5′侧翼-657~-417区段内存在着较强的TPA应答元件.生物信息学分析显示,NGAL5′侧翼-657~-417区段至少存在3个潜在的TPA应答元件,表明有应答TPA刺激的结构基础.这些研究有助于从分子水平揭示TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中NGAL基因过表达机制.
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关 键 词: | NGAL基因 食管癌细胞 基因表达调控 TPA应答元件 |
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