| 家蝇抗菌肽Defensin基因同向串联表达载体的构建和鉴定 |
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| 引用本文： | 王婷婷,金小宝,朱家勇,刘雷山.家蝇抗菌肽Defensin基因同向串联表达载体的构建和鉴定[J].生物技术,2006,16(2):3-5. |
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| 作者姓名： | 王婷婷 金小宝 朱家勇 刘雷山 |
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| 作者单位： | 1. 广东医学院,广东,湛江,520423
2. 广东药学院病原生物学教研室,广东,广州,510224 |
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| 基金项目： | 广州市科技局科技攻关项目(No.2005Z3-E0211) |
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| 摘 要： | 目的:构建家蝇抗菌肽Defensin基因多拷贝串联体,并克隆到甲醇酵母分泌表达载体pPIC9K上。方法:PCR法扩增家蝇抗菌肽Defensin基因成熟肽片断,目的片断的上游5′端带有EcoRⅠ和NheⅠ位点,下游5′端带有NotⅠ和XbaⅠ位点,目的片断首先克隆入pMD18-T载体,利用pMD18-T载体的NdeⅠ位点和目的片断上的一对同尾酶(NheⅠ和XbaⅠ),多次酶切连接,串联成多拷贝的Defensin成熟肽基因,再用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切,最后克隆入甲醇酵母分泌表达载体pPIC9K。结果:PCR鉴定、酶切鉴定和DNA测序证明多拷贝基因重组质粒构建成功。结论:该方法能方便高效地获得所需的多拷贝基因,为进一步进行高效表达打下基础。
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| 关 键 词： | 家蝇 抗菌肽 Defensin基因 同向串联 多拷贝 |
| 文章编号： | 1004-311X（2006）02-0003-03 |
| 收稿时间： | 2005-12-21 |
| 修稿时间： | 2006-01-17 |
Construction and Identification of Cloned Vector with Multi - copy Musca domestica Antimicrobial Peptides- Defensin in the Same Direction |
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| WANG Ting-Ting,JIN Xiao-Bao,ZHU Jia-Yong,LIU Lei-Shan.Construction and Identification of Cloned Vector with Multi - copy Musca domestica Antimicrobial Peptides- Defensin in the Same Direction[J].Biotechnology,2006,16(2):3-5. |
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| Authors: | WANG Ting-Ting JIN Xiao-Bao ZHU Jia-Yong LIU Lei-Shan |
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| Institution: | 1. Guangdong Medical College, Zhanjiang 524023 ; 2. Department of Parasitology, Guangdong College of Pharmacy, Guangzhou 510224 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Musca domestica antimicrobial peptides defensin multi-copy in the same direction |
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