| Bt菌株QCL-1中cry2Ac10基因的克隆、表达和活性研究 |
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| 引用本文： | 白雪峰,李长友,程林友,郑桂玲,周洪旭,李国勋.Bt菌株QCL-1中cry2Ac10基因的克隆、表达和活性研究[J].生物技术,2007,17(4):10-13. |
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| 作者姓名： | 白雪峰 李长友 程林友 郑桂玲 周洪旭 李国勋 |
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| 作者单位： | 莱阳农学院植物保护学院,山东,青岛,266109 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 目的:从高毒力Bt菌株中克隆cry2Ac10基因,并研究其表达和杀虫活性。方法:以Bt菌株QCL-1质粒为模板,利用cry2特异性引物FY2A5和FY2A3进行PCR扩增,将目的片段克隆到表达载体pET-21b( ),构建T7启动子控制的大肠杆菌重组表达质粒pET21b-cry2Ac。经IPTG诱导后,SDS-PAGE检测基因表达情况,然后对表达产物进行生物活性测定。结果:从菌株QCL-1中克隆出目的基因,该基因的编码框由1 872个碱基组成,编码的蛋白质由623个氨基酸组成,与已报道的Cry2Ac氨基酸同源性为97.4%~99.7%。该基因(GenBank accession EF405952)已被国际Bt基因命名委员会正式命名为cry2Ac10。该基因在大肠杆菌BL21(DE3)中能够正常表达70kDa的蛋白,表达产物对棉铃虫、粘虫和粉纹夜蛾幼虫具有高毒力,同时对甜菜夜蛾幼虫生长有抑制作用,其中对棉铃虫和粘虫初孵幼虫的LC50分别为30.0μg/g和16.7μg/g。结论:成功克隆和表达了cry2Ac10基因,并明确了cry2Ac10蛋白的活性,为该基因的研究和应用奠定基础。
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| 关 键 词： | 苏云金芽孢杆菌 cry2Ac10基因 基因克隆 蛋白表达 生物活性 |
| 文章编号： | 1004-311X（2007）04-0010-04 |
| 收稿时间： | 2007-03-18 |
| 修稿时间： | 2007-05-08 |
Study on Cloning, Expression and Insecticidal Activity of A Novel Gene cry2Ac10 from Bacillus thuringiensis Strain QCL- 1 |
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| BAI Xue-feng,LI Chang-you,CHENG Lin-you,ZHENG Gui-ling,ZHOU Hong-xu,LI Guo-xun.Study on Cloning, Expression and Insecticidal Activity of A Novel Gene cry2Ac10 from Bacillus thuringiensis Strain QCL- 1[J].Biotechnology,2007,17(4):10-13. |
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| Authors: | BAI Xue-feng LI Chang-you CHENG Lin-you ZHENG Gui-ling ZHOU Hong-xu LI Guo-xun |
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| Institution: | School of Plant Protection, Laiyang Agticultural University, Qingdao 266109, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bacillus thuringiensis cry2Ac10 gene gene cloning protein expression insecticidal activity |
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