Annexin V/PI法流式细胞术检测细胞凋亡的影响因素 |
| |
引用本文: | 管强东,杨健,刘艳青,熊建平,钟义红,沈链链.Annexin V/PI法流式细胞术检测细胞凋亡的影响因素[J].生物技术,2022(6):710-714. |
| |
作者姓名: | 管强东 杨健 刘艳青 熊建平 钟义红 沈链链 |
| |
作者单位: | 1.南京医科大学公共卫生学院211166;2.南京医科大学第二附属医院泌尿外科210011; |
| |
基金项目: | 南京医科大学科技发展基金项目(NMUB2019011)。 |
| |
摘 要: | 目的]探讨消化液、细胞数量及试剂温度对Annexin V/PI法流式细胞术检测细胞凋亡率的影响。方法]细胞经Accutase或无EDTA胰酶消化后比较检测结果;含有0.5×10^(5)、1×10^(5)、2×10^(5)细胞的样本按照说明书推荐(默认含有1×10^(5)细胞)加入试剂后,比较检测结果;细胞加入室温或4℃试剂后比较检测结果。以上比较均用未处理细胞和秋水仙素处理细胞分别进行。结果]对于未处理细胞而言,与无EDTA胰酶相比,Accutase能显著减少凋亡率(2.70%vs 18.05%);而经药物处理的细胞,Accutase组凋亡率也有一定程度减少(22.32%vs 26.50%),但差异没有未处理细胞大。未处理细胞随着细胞数量的增加,PI信号并未发生明显改变,Annexin V-FITC信号与细胞数量成反比,统一十字门分析的凋亡率分别是:2.46%、1.85%、1.35%。对于药物处理的细胞差异尤其明显,统一十字门分析的凋亡率分别是:28.83%、21.27%、15.59%,因此不能用统一的十字门分析。加入4℃试剂的未处理细胞的凋亡率明显高于加入室温试剂的细胞的凋亡率(3.77%vs 8.13%),而对于药物处理的细胞,两者基本无差别(22.94%vs 22.18%)。结论]用Annexin V/PI法流式细胞术检测细胞凋亡率时,使用Accutase消化液;样本严格计数,使细胞数符合说明书要求;使用室温试剂。
|
关 键 词: | 流式细胞术 Annexin V/PI法 细胞调亡 影响因素 |
本文献已被 维普 等数据库收录! |
|