| 草鱼TRAP-PCR反应体系的建立 |
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| 引用本文： | 张志伟,韩曜平,曹哲明.草鱼TRAP-PCR反应体系的建立[J].生物技术,2006,16(2):31-34. |
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| 作者姓名： | 张志伟 韩曜平 曹哲明 |
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| 作者单位： | 1. 南京农业大学无锡渔业学院,江苏,无锡,214081
2. 中国水产科学院淡水渔业研究中心,江苏,无锡,214081 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目资助(30471343) |
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| 摘 要： | 目的:通过优化草鱼TRAP-PCR反应体系,将新型分子标记-靶位区域扩增多态性(target region amplified polymorphism,TRAP)引用到草鱼遗传多样性研究中。方法:以草鱼DNA为材料,分析了模板DNA、Mg2 、dNTPs、引物浓度,以及循环参数、退火温度对TRAP-PCR扩增结果的影响。结果:确立了稳定性强、重复性好的草鱼TRAP-PCR最佳反应体系和扩增参数:在25μl的PCR反应体系中,含约50ng模板DNA,1UTaq酶,1×PCR缓冲液,2.0mmol/L MgCl2,4种dNTPs各0.2mmol/L,固定引物与随机引物各15pmol;首先使模板在94℃变性3min;然后94℃变性1min,38℃退火1min,72℃延伸lmin进行5个循环;接着94℃变性45s,55℃退火45s,72℃延伸lmin再进行35个循环,最后72℃延伸7min。结论:TRAP-PCR反应体系稳定可靠,该新型分子标记可应用于草鱼遗传多样性研究中。
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| 关 键 词： | 草鱼 TRAP 反应体系 遗传多样性 |
| 文章编号： | 1004-311X（2006）02-0031-04 |
| 收稿时间： | 2005-11-24 |
| 修稿时间： | 2006-01-08 |
Establishment of TRAP- PCR Reaction Conditions in Grass Carp |
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| ZHANG Zhi-wei,HAN Yao-ping,CAO Zhe-ming.Establishment of TRAP- PCR Reaction Conditions in Grass Carp[J].Biotechnology,2006,16(2):31-34. |
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| Authors: | ZHANG Zhi-wei HAN Yao-ping CAO Zhe-ming |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | biochemistry Ctenopharyngodon idella TRAP reaction system genetic diversity |
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