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| HSV-1UL-12基因的克隆、表达及产物复性 | |
| 引用本文： | 陈恬,郭洪秀,陈玮,张磊,祝捷,余小平,殷建华.HSV-1UL-12基因的克隆、表达及产物复性[J].生物技术,2011,21(2). |
| 作者姓名： | 陈恬 郭洪秀 陈玮 张磊 祝捷 余小平 殷建华 |
| 作者单位： | 1. 成都医学院病原生物学教研室 2. 成都医学院生物技术系 3. 成都医学院公共卫生系,四川,成都610083 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目，四川省杰出青年科技基金项目，成都医学院创新性实验项目 |
| 摘 要： | 目的:克隆及表达单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)UL12基因,对其表达产物HSV-1碱性核酸酶(AN)进行复性,为建立抗HSV-1药物的分子筛选模型奠定了基础,对于寻找抗病毒药物具有重要意义.方法:从HSV-1感染的Vero细胞中提取HSV-1基因组DNA,通过PCR克隆出UL12基因并对其测序;然后将HSV-1 UL12基因先克隆至pMD19-T载体,再亚克隆到pET32a表达载体上,并将重组载体转化到E.coli Rosetta菌中进行表达;最后用梯度盐酸胍对表达出的包涵体进行复性.结果:成功构建了pET32a-UL12重组载体,经序列比对,与GenBank上公布的HSV-1国际标准毒株17株的UL12基因序列的同源性达到了99.2%.在E.coli Rosetta菌中以包涵体的形式表达,经复性得到有活性的HSV-1碱性核酸酶(AN).AN同时具有核酸外切酶和核酸内切酶的活性,与核酸作用60min时酶活性最高.结论:重组载体pET32a-UL12经表达、复性可获得有活性的HSV-1 AN. |
| 关 键 词： | UL12基因 克隆 表达 复性 |
Clone and Expression of HSV-1 UL-12 Gene and Product-renaturing |
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| CHEN Tian,GUO Hong-xiu,CHEN Wei,ZHANG Lei,ZHU Jie,YU Xiao-ping,YIN Jian-hua.Clone and Expression of HSV-1 UL-12 Gene and Product-renaturing[J].Biotechnology,2011,21(2). | |
| Authors: | CHEN Tian GUO Hong-xiu CHEN Wei ZHANG Lei ZHU Jie YU Xiao-ping YIN Jian-hua |
| Abstract: | |
| Keywords: | HSV-1 |
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