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重组小鼠树突状细胞因子DCF1的原核表达和纯化
引用本文:居相春,王海烽,吴婕,黄海,文铁桥.重组小鼠树突状细胞因子DCF1的原核表达和纯化[J].生物技术,2011,21(1).
作者姓名:居相春  王海烽  吴婕  黄海  文铁桥
作者单位:1. 上海大学生命科学学院;上海大学系统生物技术研究所,上海,200444
2. 上海大学系统生物技术研究所,上海,200444
3. 上海大学生命科学学院
基金项目:国家自然科学基金,上海市重点基础研究项目
摘    要:目的:克隆小鼠重组树突状细胞因子DCF1蛋白进行原核表达、纯化与鉴定.方法:采用PCR从小鼠脑cDNA克隆dcf1基因,构建DCF1原核表达重组质粒(pET30a-DCF1)并转化E.coli的BL21(DE3)菌株.IPTG诱导重组蛋白表达,并在变性条件下经Ni sepharose FF6亲和层析柱纯化,再通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定.结果:成功克隆到大小为972bp的小鼠源dcf1基因片段并准确插入表达载体pET30a,0.1 mmol/L IPTG诱导转化菌2h可表达大量的DCF1蛋白,并可经Ni Sepharose FF6柱亲和层析得到高度纯化.结论:成功获得纯化的42kDa重组小鼠DCF1蛋白,为后续进行DCF1蛋白功能研究奠定了基础.

关 键 词:树突状细胞因子1  原核表达  蛋白纯化

Prokaryotic Expression and Purification of Mouse Recombinant Dendritic Cell-derived Factor 1 - DCF1
JU Xiang-chun,WANG Hai-feng,WU Jie,HUANG Hai,WEN Tie-qiao.Prokaryotic Expression and Purification of Mouse Recombinant Dendritic Cell-derived Factor 1 - DCF1[J].Biotechnology,2011,21(1).
Authors:JU Xiang-chun  WANG Hai-feng  WU Jie  HUANG Hai  WEN Tie-qiao
Abstract:
Keywords:DCF1
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