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水牛CD14 cDNA的克隆、表达及鉴定
引用本文:陈品林,杜丽,雷明,成鹰,陈兴生,莫蘼,刘涛,张冬琳,崔森,王凤阳.水牛CD14 cDNA的克隆、表达及鉴定[J].生物技术,2011,21(1).
作者姓名:陈品林  杜丽  雷明  成鹰  陈兴生  莫蘼  刘涛  张冬琳  崔森  王凤阳
作者单位:1. 海南大学农学院,海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室(筹),海口市动物基因工程重点实验室,海南,海口570228
2. 海南省定安县畜牧兽医局,海南,定安,571200
基金项目:国家转基因生物新品种培育重大专项
摘    要:目的:克隆水牛白细胞分化抗原14(buffalo cluster of differentiation antigen14,bCD14)基因,表达bCD14蛋白,并进行Western Blot鉴定.方法:采用RT-PCR方法从水牛外周血白细胞中扩增bCD14基因,构建重组质粒pET28a-bCD14,转化入E coli BL21,IPTG诱导表达,对表达蛋白进行可溶性分析及Western blot鉴定.结果:bCD14基因含有一个1 122bp的开放阅读框,编码373个氨基酸;与印度水牛、挪威大鼠和人CD14的cDNA序列同源性分别为97.95%、68.78%、78.60%,氨基酸同源性分别为96.78%、61.27%、72.34%;主要以包涵体形式表达,表达蛋白经Western Blot鉴定,得到了一条约46 kD的特异性条带.结论:该文成功克隆了bCD14基因,表达了bCD14蛋白,为进一步揭示水牛抵抗革兰氏阴性菌感染的免疫机制奠定了基础.

关 键 词:水牛  克隆  表达  纯化

Cloning,Expression and Identification of CD14 cDNA of Buffalo
CHEN Pin-lin,DU Li,LEI Ming,CHENG Ying,CHEN Xing-sheng,MO Fei,LIU Tao,ZHANG Dong-lin,CUI Sen,WANG Feng-yang.Cloning,Expression and Identification of CD14 cDNA of Buffalo[J].Biotechnology,2011,21(1).
Authors:CHEN Pin-lin  DU Li  LEI Ming  CHENG Ying  CHEN Xing-sheng  MO Fei  LIU Tao  ZHANG Dong-lin  CUI Sen  WANG Feng-yang
Abstract:
Keywords:CD14
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