| 小麦RCA的cDNA片断克隆和反义表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 封德顺,王洪刚,田纪春,李兴锋,高居荣.小麦RCA的cDNA片断克隆和反义表达载体的构建[J].生物技术,2007,17(4):21-25. |
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| 作者姓名： | 封德顺 王洪刚 田纪春 李兴锋 高居荣 |
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| 作者单位： | 山东农业大学农学院,作物生物学国家重点实验室,山东,泰安,271018 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;山东省科技重点项目 |
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| 摘 要： | 目的:试图分离和克隆小麦Rubisco活化酶cDNA片断并构建反义表达载体。方法:采用RT-PCR技术克隆cDNA片断,对序列用Blast等软件进行分析,并将该片断反向连接于植物表达载体pROK2的CaMV35S启动子下游,构建反义表达载体。结果:获得了小麦Rubisco活化酶(RCA)的cDNA片断(GenBank注册号:DQ984669);小麦RCA的cDNA片断推导的氨基酸序列与其它植物的RCA氨基酸序列高度同源。序列比较表明,用本实验所得的cDNA序列推导出的氨基酸序列与GenBank登录的大麦(AAA63163)、南极银须草(AAP83928)、水稻(AAX95414)、玉米(AAC97932)、拟南芥(NP 850321)和烟草(CAA78703)等的RCA序列的同源性分别为97%、95%、88%、83%、82%和82%;分析表明,该序列为新的小麦RCAα的cDNA序列;通过选择和引入合适的酶切位点进行载体构建,构建了小麦RCA的cDNA反义表达载体pR-AntiRCA。结论:构建成了小麦RCA的cDNA反义表达载体。
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| 关 键 词： | 小麦(Triticum aestivun) Rubisco活化酶(RCA) 反义 |
| 文章编号： | 1004-311X（2007）04-0021-05 |
| 收稿时间： | 2007-04-26 |
| 修稿时间： | 2007-06-01 |
Cloning of Wheat Rubisco Activase cDNA Fragment and Construction of Antisense Expression Vector |
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| FENG De-shun,WANG Hong-gang,TIAN Ji-chun,LI Xing-feng,GAO Ju-rong.Cloning of Wheat Rubisco Activase cDNA Fragment and Construction of Antisense Expression Vector[J].Biotechnology,2007,17(4):21-25. |
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| Authors: | FENG De-shun WANG Hong-gang TIAN Ji-chun LI Xing-feng GAO Ju-rong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cDNA |
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