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一种适于微生物多样性分析的青贮饲料总DNA的提取方法
引用本文:马俊孝,孔健,季明杰.一种适于微生物多样性分析的青贮饲料总DNA的提取方法[J].生物技术,2009,19(1).
作者姓名:马俊孝  孔健  季明杰
作者单位:1. 山东大学微生物技术国家重点实验室,山东,济南,250100;康地恩生物集团,山东,青岛,266061
2. 山东大学微生物技术国家重点实验室,山东,济南,250100
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划) 
摘    要:目的:提出一种适于微生物多样性分析的青贮饲料中微生物总DNA的提取方法,并评价其效果.方法:间接法抽提样本的总DNA,通过琼脂糖电泳、紫外吸收及PCR分析DNA质量,DGGE评价提取效果,用PCR扩增目的菌株的特定片段来检测提取方法的灵敏度.结果:两个样本DNA的A260/A280值分别为1.99和1.93,A260/,A230值分别为2.19和1.90,提取的DNA不需纯化便可直接用于16S rRNA基因的扩增,提取方法灵敏度为3cfu/g,DGGE结果表明提取方法可以涵盖样品中的所有微生物.结论:提取的DNA纯度较高,可直接用于下游分子操作,提取方法灵敏度较高,能全面反映样品中的微生物原貌,可用于免培养法研究青贮饲料中的微生物菌群组成.

关 键 词:青贮饲料  DNA提取  微生物多样性

A Method of Extracting Total DNA from Silage for Microbial Diversity Analysis
MA Jun-xiao,KONG Jian,JI Ming-jie.A Method of Extracting Total DNA from Silage for Microbial Diversity Analysis[J].Biotechnology,2009,19(1).
Authors:MA Jun-xiao  KONG Jian  JI Ming-jie
Abstract:
Keywords:DGGE
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