| SELEX法体外筛选胃癌细胞适配子方法的建立 |
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| 引用本文： | 李真真,韩跃武,刘玲玲,韩亚萍,路艳,王春霞.SELEX法体外筛选胃癌细胞适配子方法的建立[J].生物技术,2009,19(3). |
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| 作者姓名： | 李真真 韩跃武 刘玲玲 韩亚萍 路艳 王春霞 |
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| 作者单位： | 兰州大学基础医学院医学生物化学与分子生物学研究所,甘肃,兰州,730000 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，甘肃省科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 目的:建立SELEX技术筛选胃癌细胞SGC-7901适配子的方法,并初步鉴定获得的SGC-790 1细胞适配子.方法:体外合成全长88bp中间含52bp随机序列的ssDNA文库 ,通过优化PCR扩 增条件,利用地高辛-抗地高辛抗体-碱性磷酸酶系统测定亲和力,经SELEX反复筛选获得胃 癌SGC-7901细胞的特异性适配子.将最后一轮筛选产物克隆、测序并用相关软件分析适配子 序列的一级结构和二级结构.结果:经12轮SELEX筛选,ssDNA文库与SGC- 7901细胞的亲和力由0.16上升至1.14,表明特异性适配子得到逐步富集.22个克隆子测序, 有4个序列完全一致,二级结构预测茎环可能是适配子与胃癌细胞作用的结构基础.结论:成功建立了SELEX技术体外筛选胃癌细胞SGC-7901高亲和性适配子的方法.
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| 关 键 词： | 胃癌细胞 适配子 随机ssDNA文库 |
In vitro Selection of Aptamers to Gastric Cancer Cells by SELEX |
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| LI Zhen-zhen,HAN Yue-wu,LIU Ling-ling,HAN Ya-ping,LU Yan,WANG Chun-xia.In vitro Selection of Aptamers to Gastric Cancer Cells by SELEX[J].Biotechnology,2009,19(3). |
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| Authors: | LI Zhen-zhen HAN Yue-wu LIU Ling-ling HAN Ya-ping LU Yan WANG Chun-xia |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SELEX |
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