猪β2-AR基因重组质粒的快速筛选

为建立一种高效快速鉴定重组质粒的实验方法，将猪β2-肾上腺素能受体（β2-AR）基因与pET-32C重组，构建β2-AR基因表达载体pET32CAR,以T7启动子引物和猪β2-肾上腺素能受体基因特异性引物为PCR引物，挑取重组质粒转化单菌落直接进行PCR，产物经电泳发现，5个候选克隆中有3个克隆扩增出了一条约2kb的特异性条带，并且插入方向正确，随机选取其中1个克隆用限制性酶切鉴定以及DNA测序验证PCR筛选的正确性，研究结果表明；在采用PCR方法对重组克隆进行鉴定时，可以直接使用细菌菌落参与反应，而无须提取克隆的DNA，与传统的实验方法相比，筛选的时间缩短至3-4h，大大提高了重组DNA的筛选效率。