| 拟南芥肌醇半乳糖苷合成酶与棉子糖合成酶的体外催化活性比较 |
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| 引用本文： | 郑小芬,李晓霞,黄金兰,余方回,刘妙玲,范芳,黄迎娣,张玲,周英彪.拟南芥肌醇半乳糖苷合成酶与棉子糖合成酶的体外催化活性比较[J].生物技术,2019(1):69-76. |
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| 作者姓名： | 郑小芬 李晓霞 黄金兰 余方回 刘妙玲 范芳 黄迎娣 张玲 周英彪 |
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| 作者单位： | 广东省岭南特色果蔬加工及应用工程技术研究中心广东普通高校食品科学创新团队广东石油化工学院生物与食品工程学院 |
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| 基金项目： | 广东省岭南特色果蔬加工关键技术及应用工程技术研究中心项目(粤科函产学研字[2015]1487号);广东普通高校食品科学创新团队项目(2016KCXTD020);广东石油化工学院人才引进项目(2018rc36);广东石油化工学院食品科学学科开放基金项目(2017CXTD08);广东省自然科学基金项目(2018A030307051) |
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| 摘 要： | 目的]基因克隆及原核表达纯化后比较拟南芥的2个肌醇半乳糖苷合成酶及2个棉子糖合成酶的体外催化活性,为微生物法或酶法合成棉子糖尊定基础。方法]RT-PCR克隆拟南芥的肌醇半乳糖苷合成酶(GolS1及GolS3)与棉子糖合成酶(RafS1及RafS5)的基因,分别构建原核表达菌株,诱导表达纯化获得酶,电泳检测及蛋白定量后进行体外酶催化反应,HPLC分析产物。结果]克隆到GolS1与GolS3及RafS1与RafS5的基因,原核表纯化获得纯酶,以反应体系中目标产物生成速率衡量,GolS1与GolS3催化速率分别为0.51和0.28mmol/(mg·min),RafS1与RafS5的催化速率分别为0.45和0.21mmol/(mg·min)。结论]拟南芥的肌醇半乳糖苷合成酶(GolS1及GolS3)与棉子糖合成酶(RafS1及RafS5)基因经异源表达后具有良好酶活,其中GolS1酶活是GolS3的1.82倍,RafS1酶活是RafS5的2.14倍。
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| 关 键 词： | 棉子糖 肌醇半乳糖苷合成酶 棉子糖合成酶 拟南芥 基因克隆 体外催化活性 |
Comparison of the catalytic activity in vitro for the galactinol synthase and raffinose synthetase from Arabidopsis thaliana |
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| ZHENG Xiao-fen,LI Xiao-xia,HUANG Jin-lan,YLi Fang-hui,LIU Miao-ling,FAN Fang,HUANG Ying-di,ZHANG Ling,ZHOU Ying-biao.Comparison of the catalytic activity in vitro for the galactinol synthase and raffinose synthetase from Arabidopsis thaliana[J].Biotechnology,2019(1):69-76. |
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| Authors: | ZHENG Xiao-fen LI Xiao-xia HUANG Jin-lan YLi Fang-hui LIU Miao-ling FAN Fang HUANG Ying-di ZHANG Ling ZHOU Ying-biao |
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| Institution: | (Technology Research Center for Lingnan Characteristic Fruits and Vegetables Processing and ApplicationEngineering of Guangdong Province,Food Science Innovation Team of Guangdong Higher Education Institutes,College of Biological and Food Engineering,Guangdong University of Petrochemical Technology,Maoming 525000,China) |
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| Abstract: | ZHENG Xiao-fen;LI Xiao-xia;HUANG Jin-lan;YLi Fang-hui;LIU Miao-ling;FAN Fang;HUANG Ying-di;ZHANG Ling;ZHOU Ying-biao(Technology Research Center for Lingnan Characteristic Fruits and Vegetables Processing and ApplicationEngineering of Guangdong Province,Food Science Innovation Team of Guangdong Higher Education Institutes,College of Biological and Food Engineering,Guangdong University of Petrochemical Technology,Maoming 525000,China) |
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| Keywords: | raffinose galactinol synthase raffinose synthetase Arabidopsis thaliana gene clone catalytic activity in vitro |
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