| 小麦内源特异参照基因的查找与定性PCR和实时荧光PCR验证 |
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| 引用本文： | 栾凤侠,张洪祥,白月.小麦内源特异参照基因的查找与定性PCR和实时荧光PCR验证[J].生物技术,2006,16(6):50-52. |
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| 作者姓名： | 栾凤侠 张洪祥 白月 |
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| 作者单位： | 黑龙江出入境检验检疫局,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 国家质检总局资助项目;科技部社会公益研究项目 |
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| 摘 要： | 目的:先从理论上查找和比对了小麦属(Triticum)γ-醇溶蛋白基因(GAG56D)为小麦特异的内源基因,并用定性PCR和实时荧光PCR方法从实验特异性上进行了验证。方法:选择小麦基因组中部分基因序列在NCBI中进行同源性分析,查找在小麦中存在的内源特异参照基因,找到小麦属(Triticum)特异的γ-醇溶蛋白基因(GAG56D),设计并合成该基因的引物和探针序列,同时用定性PCR和实时荧光PCR方法进行检测,并优化了实验条件。结果:不仅在理论上查找和比对了γ-醇溶蛋白基因为小麦特异的内源基因,并用定性PCR和实时荧光PCR方法进行了实验特异性的验证。定性PCR产物经过琼脂糖凝胶电泳分析后,只在小麦属中可以检测到328bp的目的片段,而在其它作物中未扩增出目的片断。同样实时荧光PCR验证的结果小麦属内各个种均有扩增曲线出现,而在其它作物没有扩增曲线出现中。结论:该基因与方法可用作检测小麦属(唯一小麦种是栽培作物)内源特异参照基因。
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| 关 键 词： | 小麦 内源参照基因 小麦γ-醇溶蛋白 GAG56D PCR Real-time PCR |
| 文章编号： | 1004-311X（2006）06-0050-03 |
| 收稿时间： | 2006-07-20 |
| 修稿时间： | 2006-10-20 |
Search and Detection of Specific Endogenuous Reference Gene in Wheat |
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| LUAN Feng-xia,ZHANG Hong-xiang,BAI Yue.Search and Detection of Specific Endogenuous Reference Gene in Wheat[J].Biotechnology,2006,16(6):50-52. |
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| Authors: | LUAN Feng-xia ZHANG Hong-xiang BAI Yue |
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| Institution: | Heilongiiang Entry- Exit Inspection and Quarantine Bureau, Harbin 150001, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | GAG56D PCR Real-time PCR |
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