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益智ISSR-PCR反应体系建立与优化
引用本文:刘晓静,王文泉,郭凌飞.益智ISSR-PCR反应体系建立与优化[J].生物技术,2008,18(3):33-37.
作者姓名:刘晓静  王文泉  郭凌飞
作者单位:1. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口,571101;华南热带农业大学农学院,海南儋州,571737
2. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口,571101
3. 中国热带农业科学院南亚热带作物研究所,广东湛江,524091;华南热带农业大学园艺学院,海南儋州,571737
摘    要:目的:获得适合的益智ISSR-PCR扩增反应体系。方法:利用正交设计L46(4^5)和单因素试验对益智ISSR-PCR反应体系的5因素(Taq酶,Mg^2+,模板DNA.dNTPs,引物)在4个水平上进行优化试验,将二者所得结果进行综合比较分析。结果:最终扶得益智ISSR-PCR反应的最优体系(20μl)为:模板DNA 100ng,Mg^2+ 3.0mmol/L,引物0.8μmol/L,dNTPs0.25mmol/L,Taq DNA聚合酶1.0U。最后,对益智ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火,得到最佳退火温度为50℃。结论:这一优化系统的建立为今后利用ISSR标记技术研究分析益智遗传多样性奠定基础。

关 键 词:益智  ISSR-PCR  正交设计  单因素试验  体系优化

Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Alpinia oxyphylla Miq.
LIU Xiao-jing,WANG Wen-quan,GUO Ling-fei.Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Alpinia oxyphylla Miq.[J].Biotechnology,2008,18(3):33-37.
Authors:LIU Xiao-jing  WANG Wen-quan  GUO Ling-fei
Abstract:
Keywords:
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