猪卵透明带ZP3α真核表达载体的构建及体外瞬时表达 |
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引用本文: | 孙彩军,潘善培,谢琪璇,肖銮娟,唐键.猪卵透明带ZP3α真核表达载体的构建及体外瞬时表达[J].生物技术,2004,14(2):3-5. |
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作者姓名: | 孙彩军 潘善培 谢琪璇 肖銮娟 唐键 |
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作者单位: | 暨南大学生殖免疫研究所,广东,广州,510632 |
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摘 要: | 目的:构建猪卵透明带zP3α真核表达栽体,为探讨卵透明带DNA疫苗避孕疫苗奠定基础。方法:采用PCR法获得了去除N端信号肽序列和C端跨膜区序列的猪卵透明带ZP3α的cDNA序列片段,以专门用于发展DNA疫苗的质粒pVAX1为载体构建了真核细胞表达质粒pvAX1-pZP3α。通过脂质体转染将之导入HeLa细胞进行体外瞬时表达,然后采用RT—PGR和间接免疫荧光技术(IIF)检测pZP3α在mRNA水平的转录和蛋白质水平上的表达。结果:真核细胞表达质粒pVAX1-pZP3α构建成功,用RT-PCR和IIF技术检测到了pZP3α在HeLa胞中的转录与表达。结论:真核表达载体pVAX1—pzP3aα的成功构建和表达为研制开发有效的人用卵透明带DNA避孕疫苗奠定了基础。
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关 键 词: | 猪卵透明带 zP3α 真核表达栽体 DNA疫苗 免疫避孕 |
文章编号: | 1004-311X(2004)02-0003-03 |
修稿时间: | 2003年9月9日 |
Construction of Porcine Zona Pellucida-3α Eukaryotic Expression Vector and its Transient Expression in HeLa Cells |
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Abstract: | |
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Keywords: | Zona pellucida(ZP) Eukaryotic expression vector DNA vaccine Immunocontraception |
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