| 人EPO高效表达细胞株的筛选与鉴定 |
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| 引用本文： | 孙丽翠,刘芃芃,刘维全,张玉国,齐顺章,祁雅慧.人EPO高效表达细胞株的筛选与鉴定[J].生物技术,2004,14(5):52-54. |
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| 作者姓名： | 孙丽翠 刘芃芃 刘维全 张玉国 齐顺章 祁雅慧 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业大学生物学院,北京,100094
2. 首都医科大学实验中心,北京,100054 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (3950 0 0 84) |
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| 摘 要： | 用氨甲喋呤 (MTX)对稳定转染人促红细胞生成素 (EPO)基因的CHOˉ(DHFR缺陷型 )细胞株进行梯度加压 ,并使用α -MEM培养基进行培养 ,使DHFR基因在CHOˉ细胞中大量扩增 ,从而使EPO的表达量提高。经检测分析EPO的表达量 ,筛选出EPO高效表达的细胞株。结果表明 ,用MTX加压到 16× 10 - 7mol l和 6 4× 10 - 7mol l浓度时 ,收集的细胞培养液经 (NH4 ) 2 SO4 盐析、透析等处理得到EPO抽提液 ,经SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS -PAGE)检测出与标准品相对应的一条带 ,WesternBlot证明该带确为EPO。
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| 关 键 词： | EPO 高效表达细胞株 MTX 鉴定 |
| 文章编号： | 1004-311X(2004)05-0052-03 |
| 修稿时间： | 2004年3月18日 |
Screening and Identification of hEPO Highly- expressing Cell Strain |
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| SUN Li-cui,LIU Peng-peng,LIU Wei-quan,ZHANG Yu-guo,QI Shun-zhang,QI Ya-hui.Screening and Identification of hEPO Highly- expressing Cell Strain[J].Biotechnology,2004,14(5):52-54. |
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| Authors: | SUN Li-cui LIU Peng-peng LIU Wei-quan ZHANG Yu-guo QI Shun-zhang QI Ya-hui |
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| Institution: | SUN Li-cui~1,LIU Peng-peng~1,LIU Wei-quan~1,ZHANG Yu-guo~1,QI Shun-zhang~1,QI Ya-hui~2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | EPO highly-expressing cell strain MTX Identification |
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