|
|||||
|
|
| 可分泌性GLP-1重组慢病毒的构建 | |
| 引用本文： | 娄明武,张明东,梁冰,范义,王全颖.可分泌性GLP-1重组慢病毒的构建[J].生物技术,2008,18(6). |
| 作者姓名： | 娄明武 张明东 梁冰 范义 王全颖 |
| 作者单位： | 1. 深圳市龙岗中心医院介入影像科,广东深圳,518116 2. 北华大学,吉林吉林,132013 3. 西安市华广生物工程有限公司,陕西西安,710000 |
| 基金项目： | 广东省科技厅科技攻关项目 ， 深圳市科技和信息局项目 |
| 摘 要： | 目的:为了探讨使用基因治疗在体内分泌表达胰高血糖素样肽-1(GLP-1)方法治疗糖尿病的可行性,构建可分泌表达GLP-1的重组慢病毒.方法:1.将已构建成功的NT4-GLP-1融合基因插入慢病毒包装质粒pLenti6V5D-TOPO中,构建pLenti6V5D-TOPO/NT4-GLP-1重组慢病毒包装质粒.2.用慢病毒包装辅助质粒plp1、plp2、plp/VSVG,及重组慢病毒包装质粒pLenti6V5D-TOPO/NT4-GLP-1,四质粒磷酸钙共沉淀法转染80%融合的293细胞系,包装慢病毒.3.通过免疫组化法染色确定重组慢病毒效应.结果:重组质粒经BamHI和XhoI联合酶切,10g/L琼脂糖凝胶电泳可见在342bp处有一目的片段.该值与NT4-GLP-1融合基因片段的大小一致,说明NT4-GIP-1融合基因已经成功重组于慢病毒包装质粒pLenti6V5D-TOPO内.免疫组化结果显示,实验组细胞内出现大量棕黄色颗粒,阳性细胞达到70%以上,对照组中没有阳性细胞,所以说明NT4-GLP-1重组慢病毒在细胞中可以正确地分泌表达GLP-1.结论:NT4-GLP-1重组慢病毒包装质粒构建正确,病毒包装成功. |
| 关 键 词： | NT4-GLP-1融合基因 重组慢病毒 |
Construction of Recombinant Lentivirus Vector Expressing GLP-1 |
|
| LOU Ming-wu,ZHANG Ming-dong,LIANG Bing,FAN Yi,WANG Quan-ying.Construction of Recombinant Lentivirus Vector Expressing GLP-1[J].Biotechnology,2008,18(6). | |
| Authors: | LOU Ming-wu ZHANG Ming-dong LIANG Bing FAN Yi WANG Quan-ying |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
| 本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录！ | |