大肠杆菌肠毒素ST1、LTB基因融合及其免疫原性研究 |
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引用本文: | 许崇利,许崇波,逄越,王炎林.大肠杆菌肠毒素ST1、LTB基因融合及其免疫原性研究[J].生物技术,2006,16(4):7-10. |
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作者姓名: | 许崇利 许崇波 逄越 王炎林 |
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作者单位: | 1. 宁夏大学生命科学学院,宁夏,银川,750021 2. 大连大学生物工程学院,辽宁,大连,116622 |
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基金项目: | 大连市科学技术基金项目资助(“仔猪大肠杆菌病、传染性胃肠炎病基因工程疫苗的研制”,No.2004027) |
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摘 要: | 目的:构建大肠杆菌肠毒素ST1-LTB融合基因,并研究其表达产物的免疫原性。方法:采用PCR和基因突变技术,从大肠杆菌C83902质粒中扩增ST1突变基因和LTB基因,通过基因分离、纯化、内切酶酶切、连接和转化,构建含ST1-LTB融合基因表达载体的重组菌株,并用酶切和DNA序列分析鉴定重组质粒,同时用ST1-LTB融合蛋白粗提物免疫小鼠,观察免疫攻毒保护效果。结果:构建了含ST1-LTB融合基因表达载体的重组菌株BL21(DE3)(pXSL1),ST1-LTB融合基因的序列和阅读框架均正确,其表达的ST1-LTB融合蛋白能够被ST1单抗和LTB抗体识别,且该融合蛋白已丧失天然ST1肠毒素的活性。ST1-LTB融合蛋白能够诱发小鼠产生抗体,该抗体具有中和天然ST1肠毒素的毒性作用。结论:构建的重组菌株BL21(DE3)(pXSL1)可以高效表达ST1-LTB融合蛋白,其表达产物ST1-LTB融合蛋白具有良好的免疫原性,为更有效地预防仔猪黄痢提供了一种新型基因工程菌苗候选菌株。
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关 键 词: | ST1基因 LTB基因 融合基因 基因表达 免疫原性 |
文章编号: | 1004-310X(2006)04-0007-04 |
收稿时间: | 2006-04-02 |
修稿时间: | 2006-04-022006-05-09 |
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