| 抗HIV-1 p15(gag)IgY抗体的制备及活性检测 |
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| 引用本文： | 赵文思,邹晓华,沈雪莲,王海龙,柳发勇,刘朝奇.抗HIV-1 p15(gag)IgY抗体的制备及活性检测[J].生物技术,2012,22(4):79-83. |
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| 作者姓名： | 赵文思 邹晓华 沈雪莲 王海龙 柳发勇 刘朝奇 |
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| 作者单位： | 1. 三峡大学医学院,湖北宜昌,443002
2. 三峡大学分子生物学研究所,湖北宜昌,443002 |
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| 摘 要： | 目的:制备具有高效价强特异性的抗HIV-1 p15(gag)鸡卵黄抗体(IgY),纯化并分析其免疫学活性。方法:用纯化的HIV-1 p15(gag)蛋白抗原免疫蛋鸡,用水稀释法对IgY抗体进行粗提取并结合乙醇沉淀和氯化钠盐析法纯化抗体,再通过SDS-PAGE、Western blot、酶联免疫吸附实验(ELISA)检测抗体的纯度、特异性及效价。结果:表达纯化的HIV-1 p15(gag)-GST融合蛋白分子量为45kDa,用于抗体检测的抗原。用纯化的His-P15蛋白作为免疫原免疫蛋鸡后,获得的卵黄抗体重链、轻链分子量分别为65kDa和25kDa。8倍体积水稀释卵黄,pH值5.1,20%冰乙醇及0.028mol/L盐溶液分离纯化,纯度可达96℅,每毫升卵黄液可得到的卵黄抗体为9.8mg。终浓度为18%～25%的冰乙醇纯化的抗体浓度高且稳定,同时具有较强的特异性和较高的效价。结论:用HIV-1p15(gag)蛋白免疫蛋鸡,可以获得高效价的特异性抗体IgY,为IgY抗体在HIV-1p15蛋白的研究奠定了实验基础。
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| 关 键 词： | HIV-1p15蛋白 卵黄抗体 抗体分离纯化 活性检测 |
Preparation of Anti-HIV-1P15(gag)IgY and Detection of Its Biological Activity |
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| ZHAO Wen-si
,
ZOU Xiao-hua
,
SHEN Xue-lian
,
WANG Hai-long
,
LIU Fa-yong
,
LIU Chao-qi.Preparation of Anti-HIV-1P15(gag)IgY and Detection of Its Biological Activity[J].Biotechnology,2012,22(4):79-83. |
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| Authors: | ZHAO Wen-si ZOU Xiao-hua SHEN Xue-lian WANG Hai-long LIU Fa-yong LIU Chao-qi |
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| Institution: | 1.Medical College,Three Gorges University,Yichang 443002,China;2.Institute of MolecularBiology,Three Gorges University,Yichang 443002,China) |
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| Abstract: | |
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